Gå direkte til indholdet
RAW 264.7
Væv
Ascites
Sygdom
Leukæmi
Synonymer
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Dokumenter

RAW 264.7

Cell line · Varenummer 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

RAW 264.7-celler er en meget anvendt murin makrofagcellelinje, der stammer fra ascites fra en hanmus med en tumor induceret af Abelson murin leukæmivirus, og som ofte bruges i immunologisk og infektiøs sygdomsforskning. Som en udødeliggjort cellelinje er RAW264.7-celler et vigtigt modelsystem til undersøgelse af makrofagbiologi, herunder immunrespons på patogener, signaltransduktion og genekspression.

RAW264.7-celler er særligt værdifulde på grund af deres evne til at differentiere sig til makrofaglignende celler. Disse celler kan polariseres til M1-makrofager, der er forbundet med inflammatoriske reaktioner, eller M2-makrofager, der er forbundet med vævsreparation og antiinflammatoriske processer. Denne polariseringskapacitet sammen med deres evne til at udføre vigtige makrofagfunktioner som pinocytose og fagocytose understreger deres relevans i studiet af makrofagbiologi og det komplekse samspil mellem immunresponser og patogener.

RAW 264.7-celler er medvirkende til at studere immunsystemets samspil med forskellige faktorer, herunder patogener og knoglebiologi. RAW264.7-celler kan induceres til at differentiere sig til osteoklastlignende celler under visse betingelser, f.eks. eksponering for RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), hvilket gør dem til en model til undersøgelse af visse aspekter af osteoklastbiologi og knogleresorption.

RAW264.7-cellelinjens reaktion på forskellige stimuli, herunder induktion af pyroptose, en inflammatorisk celledødsproces, der udløses af faktorer som LPS (lipopolysaccharid), er medvirkende til at dissekere de veje, der fører til produktion af inflammatoriske cytokiner. Indvirkningen af miljømæssige forhold, såsom ekstracellulære glukoseniveauer på cellefunktion og fænotype, giver indsigt i cellulær metabolisme og den potentielle nedregulering af inflammatoriske reaktioner.

RAW264.7-celler med deres oprindelse i murin leukæmi og deres omfattende brug i immunologisk forskning tjener som et afgørende værktøj til at fremme vores forståelse af makrofagbiologi, immunsystem-patogendynamik, osteoimmunologi og inflammatoriske reaktioner, hvilket fremhæver deres uundværlige rolle i både grundlæggende og anvendt biomedicinsk forskning.

Væv
Ascites
Sygdom
Leukæmi
Synonymer
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Celletype
Makrofag
Fordoblingstid
RAW264.7-celler har en fordoblingstid på mellem 11 og 30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
RAW 264.7 (Cytion katalognummer 400319)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Immunglobulin (Fc), komplement (C3)
Antigenudtryk
H-2d
Vira
Cellelinjen blev testet og fundet positiv for Reverse Transcriptase (RT) aktivitet fra C-Type retrovirus i cellekulturens supernatant og celleekstrakt. Ectromelia-virus (musekopper) kan udskilles.
Produkter
Lysozym

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Stærkt klæbende celler, brug af celleskraber
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
BALB/c
Donorens alder
Voksen