Gå til innholdet
RAW 264.7
Vev
Ascites
Sykdom
Leukemi
Synonymer
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Dokumenter

RAW 264.7

Cell line · Produktnummer 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

RAW 264.7-celler er en mye brukt murin makrofagcellelinje som stammer fra ascites fra en hannmus med en svulst indusert av Abelson murint leukemivirus, og som ofte brukes i immunologisk forskning og forskning på infeksjonssykdommer. RAW264.7-celler er en udødeliggjort cellelinje og er et viktig modellsystem for studier av makrofagers biologi, inkludert immunresponser på patogener, signaltransduksjon og genuttrykk.

RAW264.7-celler er spesielt verdifulle på grunn av deres evne til å differensiere til makrofaglignende celler. Disse cellene kan polariseres til M1-makrofager, som er forbundet med inflammatoriske responser, eller M2-makrofager, som er knyttet til vevsreparasjon og antiinflammatoriske prosesser. Denne polariseringskapasiteten, sammen med deres evne til å utføre essensielle makrofagfunksjoner som pinocytose og fagocytose, understreker deres relevans i studier av makrofagbiologi og det komplekse samspillet mellom immunresponser og patogener.

RAW 264.7-celler er avgjørende for å studere immunsystemets samspill med ulike faktorer, inkludert patogener og beinbiologi. RAW264.7-celler kan induseres til å differensiere til osteoklastlignende celler under visse betingelser, for eksempel ved eksponering for RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), noe som gjør dem til en modell for å studere visse aspekter av osteoklastbiologi og benresorpsjon.

RAW264.7-cellelinjens respons på ulike stimuli, inkludert induksjon av pyroptose, en inflammatorisk celledødsprosess som utløses av faktorer som LPS (lipopolysakkarid), er viktig for å dissekere veiene som fører til produksjon av inflammatoriske cytokiner. Effekten av miljøforhold, som ekstracellulære glukosenivåer på cellefunksjon og fenotype, gir innsikt i cellulær metabolisme og potensiell nedregulering av inflammatoriske responser.

RAW264.7-celler, som har sin opprinnelse i murin leukemi og er mye brukt i immunologisk forskning, er et viktig verktøy for å øke vår forståelse av makrofagbiologi, immunsystemets dynamikk i forhold til patogener, osteoimmunologi og betennelsesresponser, noe som understreker deres uunnværlige rolle i både grunnleggende og anvendt biomedisinsk forskning.

Vev
Ascites
Sykdom
Leukemi
Synonymer
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Celletype
Makrofag
Fordoblingstid
RAW264.7-celler har en fordoblingstid som varierer fra 11 til 30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
RAW 264.7 (Cytion-katalognummer 400319)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Immunglobulin (Fc), komplement (C3)
Antigenuttrykk
H-2d
Virus
Cellelinjen ble testet og funnet positiv for Reverse Transcriptase (RT)-aktivitet fra C-type retrovirus i cellekulturens supernatant og celleekstrakt. Ektromelia-virus (musekopper) kan skilles ut.
Produkter
Lysozym

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Sterkt klebende celler, bruk av celleskraper
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
BALB/c
Donorens alder
Voksen