Gå til innholdet
HUVEC
Vev
Umbilical vene
Synonymer
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Dokumenter

HUVEC

Primary cell · Produktnummer 300605

Allsidig modell for forskning på endotelceller og blodkar

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Humane endotelceller fra navlestrengen (HUVECs) er primære celler som stammer fra endotelet i venene i navlestrengen hos mennesker. HUVEC er en sentral modell i vaskulærbiologisk forskning på grunn av deres evne til å gjenskape mange aspekter ved endotelcellenes biologi in vivo. Disse cellene brukes i stor utstrekning til å studere endotelfunksjoner, inkludert angiogenese, inflammasjon og mekanismer for vaskulær permeabilitet.

HUVECs har flere viktige endotelmarkører, som von Willebrand-faktor, CD31 og endotelial nitrogenoksidsyntase (eNOS), noe som bekrefter deres endoteliale opprinnelse og funksjonalitet. De er også i stand til å danne rørlignende strukturer når de dyrkes på matrigel, noe som viser at de har potensial for angiogenesestudier.

HUVECs evne til å reagere på cytokiner og vekstfaktorer gjør dem til et utmerket system for å utforske cellulære responser forbundet med vaskulære sykdommer som aterosklerose, hypertensjon og trombose. Dessuten kan deres reaksjon på skjærspenning studeres i dynamiske strømningsmodeller, noe som gir innsikt i blodstrømmens innvirkning på endotelatferd.

I farmakologisk forskning brukes HUVEC ofte til å evaluere effekten og toksisiteten til vaskulære virkestoffer. De er enkle å isolere og relativt enkle å dyrke, noe som gjør dem til et verdifullt verktøy i både akademisk forskning og farmasøytisk utvikling. Disse egenskapene understreker HUVECs betydning for vår forståelse av vaskulær helse og sykdom.

Vev
Umbilical vene
Søknader
Humane endotelceller fra navlevene (HUVEC) er mye brukt i ulike biomedisinske forskningsområder fordi de raskt kan formere seg og differensiere til ulike typer endotelceller, som kler blodårene. HUVECs har mange bruksområder innen forskning og legemiddelutvikling, blant annet sårheling, angiogenese, vevsteknikk, inflammasjon, onkologi, farmakologi, vaskulær modellering og transfeksjon.
Synonymer
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Donor

Donorens alder
Newborn (umbilical cord)
Etnisitet
Kaukasisk

03Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Tomtespesifikk
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

04Egenskaper

Morfologi
Endotelial
Celletype
Primære celler
Tumorinduserende
No

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
Vekstmedium for endotelceller (PromoCell artikkelnummer C-22010)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
More than 6,000 cells/cm²
Væskefornyelse
Hver 2. til 3. dag
Gjenoppretting etter tining

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Tining og dyrking
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
CD31⁺, CD105⁺
Proteinekspresjon
Cytosplasmatisk VWF/faktor VIII > 95 % positiv ved immunfluorescens. Cytoplasmatisk opptak av Di-I-Ac-LDL > 95 % positivt ved immunfluorescens. Cytoplasmatisk PECAM1 > 95 % positiv ved immunfluorescens
Virus
Negativ for HIV-1, HBV og HCV

08Identifikatorer

Kildehenvisning
HUVEC, pooled (Cytion katalognummer 300605)
NCBI-skattenummer
9606