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HUVEC
Gewebe
Umbilikalvene
Synonyme
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

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HUVEC

Primary cell · Artikelnummer 300605

Vielseitiges Modell für die Endothel- und Gefäßforschung

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Humane Nabelvenen-Endothelzellen (HUVECs) sind primäre Zellen, die aus der Endothelschicht der Venen in der menschlichen Nabelschnur stammen. HUVECs sind ein zentrales Modell in der gefäßbiologischen Forschung, da sie viele Aspekte der Endothelzellbiologie in vivo genau nachbilden können. Diese Zellen werden ausgiebig zur Untersuchung von Endothelfunktionen, einschließlich Angiogenese, Entzündungen und Mechanismen der Gefäßpermeabilität, verwendet.

HUVECs weisen mehrere wichtige Endothelmarker auf, wie den von Willebrand-Faktor, CD31 und die endotheliale Stickstoffmonoxid-Synthase (eNOS), die ihren endothelialen Ursprung und ihre Funktionalität bestätigen. Sie sind auch in der Lage, röhrenförmige Strukturen zu bilden, wenn sie auf Matrigel kultiviert werden, was ihr Potenzial für Angiogenesestudien unter Beweis stellt.

Die Fähigkeit von HUVECs, auf Zytokine und Wachstumsfaktoren zu reagieren, macht sie zu einem ausgezeichneten System für die Erforschung zellulärer Reaktionen im Zusammenhang mit Gefäßerkrankungen wie Atherosklerose, Bluthochdruck und Thrombose. Darüber hinaus kann ihre Reaktion auf Scherbelastung in dynamischen Strömungsmodellen untersucht werden, was Einblicke in die Auswirkungen des Blutflusses auf das endotheliale Verhalten ermöglicht.

In der pharmakologischen Forschung werden HUVECs häufig eingesetzt, um die Wirksamkeit und Toxizität von Wirkstoffen zu untersuchen, die auf die Gefäße abzielen. Ihre unkomplizierte Isolierung und die relativ einfache Kultivierung machen sie zu einem wertvollen Instrument sowohl für die akademische Forschung als auch für die pharmazeutische Entwicklung. Diese Eigenschaften unterstreichen die Bedeutung von HUVECs für unser Verständnis von Gefäßgesundheit und -krankheiten.

Gewebe
Umbilikalvene
Anwendungen
Humane Nabelvenen-Endothelzellen (HUVECs) werden in verschiedenen biomedizinischen Forschungsbereichen häufig verwendet, da sie sich schnell vermehren und in verschiedene Arten von Endothelzellen differenzieren können, die Blutgefäße auskleiden. HUVECs werden in der Forschung und Arzneimittelentwicklung in vielen Bereichen eingesetzt, darunter Wundheilung, Angiogenese, Tissue Engineering, Entzündungen, Onkologie, Pharmakologie, Gefäßmodellierung und Transfektion.
Synonyme
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Spender

Alter des Spenders
Newborn (umbilical cord)
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch

03Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Los-spezifisch
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

04Merkmale

Morphologie
Endothelium
Zelltyp
Primäre Zellen
Tumorauslösend
No

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
Endothelzell-Wachstumsmedium (PromoCell-Artikelnummer C-22010)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
More than 6,000 cells/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 2 bis 3 Tage
Erholung nach dem Auftauen

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Auftauen und Kultivierung
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Expression und Anfälligkeit

Oberflächenantigene
CD31⁺, CD105⁺
Proteinexpression
Zytosplasmatischer VWF/Faktor VIII > 95 % positiv in der Immunfluoreszenz. Zytoplasmatische Aufnahme von Di-I-Ac-LDL > 95 % positiv in der Immunfluoreszenz. Zytoplasmatisches PECAM1 > 95 % positiv in der Immunfluoreszenz
Viren
Negativ für HIV-1, HBV und HCV

08Bezeichner

Quellenangabe
HUVEC, gepoolt (Cytion Katalognummer 300605)
NCBI-Steuer-ID
9606