Pereiti prie turinio
HUVEC
Audinys
Bambos vena
Sinonimai
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Dokumentai

HUVEC

Primary cell · Prekės numeris 300605

Universalus modelis endotelio ir kraujagyslių tyrimams

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Žmogaus bambos venų endotelio ląstelės (HUVEC) yra pirminės ląstelės, gautos iš žmogaus bambos venų endotelio sluoksnio. HUVEC yra pagrindinis kraujagyslių biologijos tyrimų modelis, nes jos gali tiksliai atkartoti daugelį endotelio ląstelių biologijos in vivo aspektų. Šios ląstelės plačiai naudojamos tiriant endotelio funkcijas, įskaitant angiogenezę, uždegimą ir kraujagyslių pralaidumo mechanizmus.

HUVEC pasižymi keliais svarbiais endotelio žymenimis, tokiais kaip von Willebrando faktorius, CD31 ir endotelio azoto oksido sintazė (eNOS), kurie patvirtina jų endotelio kilmę ir funkcionalumą. Be to, jie gali formuoti į vamzdelius panašias struktūras, kai kultivuojami ant Matrigelio, o tai rodo jų potencialą angiogenezės tyrimams.

Dėl HUVEC gebėjimo reaguoti į citokinus ir augimo veiksnius jie yra puiki sistema ląstelių reakcijoms, susijusioms su kraujagyslių ligomis, pavyzdžiui, ateroskleroze, hipertenzija ir tromboze, tirti. Be to, jų reakciją į šlyties įtempį galima tirti taikant dinaminius srauto modelius ir taip įžvelgti kraujo srauto poveikį endotelio elgsenai.

Atliekant farmakologinius tyrimus, HUVEC dažniausiai naudojami vertinant į kraujagysles nukreiptų medžiagų veiksmingumą ir toksiškumą. Dėl nesudėtingo jų išskyrimo ir palyginti lengvo kultivavimo jie yra vertingas įrankis tiek akademiniuose tyrimuose, tiek kuriant vaistus. Šios savybės pabrėžia HUVEC svarbą gerinant mūsų supratimą apie kraujagyslių sveikatą ir ligas.

Audinys
Bambos vena
Paraiškos
Žmogaus bambos venų endotelio ląstelės (HUVEC) plačiai naudojamos įvairiose biomedicinos tyrimų srityse, nes jos gali greitai daugintis ir diferencijuotis į įvairių tipų endotelio ląsteles, kurios išklojo kraujagysles. HUVEC gali būti plačiai naudojamos moksliniams tyrimams ir vaistų atradimams, įskaitant žaizdų gijimą, angiogenezę, audinių inžineriją, uždegimą, onkologiją, farmakologiją, kraujagyslių modeliavimą ir transfekciją.
Sinonimai
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Donoras

Donoro amžius
Newborn (umbilical cord)
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių

03Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Priklausantis nuo partijos
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

04Charakteristikos

Morfologija
Endotelis
Ląstelių tipas
Pirminės ląstelės
Tumorogeninis
No

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Endotelio ląstelių augimo terpė (PromoCell gaminio numeris C-22010)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
More than 6,000 cells/cm²
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atkūrimas po atšilimo

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Atšildymas ir auginimas
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD31⁺, CD105⁺
Baltojų baltymų ekspresija
Citosklazmos VWF ir VIII faktorius > 95 % teigiamas imunofluorescencijos rezultatas. Di-I-Ac-LDL citoplazminis pasisavinimas > 95 % teigiamas imunofluorescencijos būdu. Citoplazminis PECAM1 > 95 % teigiamas imunofluorescencijos būdu
Virusai
Neigiami ŽIV-1, HBV ir HCV rezultatai

08Identifikatoriai

Nuoroda
HUVEC, jungtinis (Cytion katalogo numeris 300605)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606