HUVEC

As células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs) são células primárias derivadas da camada endotelial das veias do cordão umbilical humano. As HUVEC são um modelo fundamental na investigação da biologia vascular devido à sua capacidade de reproduzir de perto muitos aspectos da biologia das células endoteliais in vivo. Estas células são amplamente utilizadas para estudar as funções endoteliais, incluindo a angiogénese, a inflamação e os mecanismos de permeabilidade vascular.

As HUVECs apresentam vários marcadores endoteliais críticos, como o fator von Willebrand, CD31 e óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), que afirmam a sua origem e funcionalidade endoteliais. São também capazes de formar estruturas semelhantes a tubos quando cultivadas em Matrigel, demonstrando o seu potencial para estudos de angiogénese.

A capacidade das HUVECs para responder a citocinas e factores de crescimento torna-as um excelente sistema para explorar as respostas celulares associadas a doenças vasculares como a aterosclerose, a hipertensão e a trombose. Além disso, a sua reação à tensão de cisalhamento pode ser estudada em modelos de fluxo dinâmicos, fornecendo informações sobre os efeitos do fluxo sanguíneo no comportamento endotelial.

Na investigação farmacológica, as HUVECs são normalmente utilizadas para avaliar a eficácia e a toxicidade de agentes vasculares. O seu isolamento simples e a relativa facilidade de cultura fazem delas uma ferramenta valiosa tanto na investigação académica como no desenvolvimento farmacêutico. Estes atributos sublinham a importância das HUVECs no avanço da nossa compreensão da saúde e doença vascular.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia