.jpg)
- Chusteczka
- Żyła pępowinowa
- Synonimy
- HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111
Dokumenty
HUVEC
Primary cell · Numer produktu 300605
Wszechstronny model do badań nad śródbłonkiem i układem naczyniowym
Dostosowanie / Zalecenia
- HUVECPrimary cell€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC) są pierwotnymi komórkami pochodzącymi z warstwy śródbłonka żył w ludzkiej pępowinie. HUVEC są kluczowym modelem w badaniach nad biologią naczyń krwionośnych ze względu na ich zdolność do dokładnego odtworzenia wielu aspektów biologii komórek śródbłonka in vivo. Komórki te są szeroko wykorzystywane do badania funkcji śródbłonka, w tym angiogenezy, stanu zapalnego i mechanizmów przepuszczalności naczyń.
HUVEC wykazują kilka krytycznych markerów śródbłonka, takich jak czynnik von Willebranda, CD31 i śródbłonkowa syntaza tlenku azotu (eNOS), które potwierdzają ich śródbłonkowe pochodzenie i funkcjonalność. Są one również zdolne do tworzenia struktur przypominających rurki podczas hodowli na Matrigelu, co wskazuje na ich potencjał w badaniach nad angiogenezą.
Zdolność HUVEC do reagowania na cytokiny i czynniki wzrostu czyni je doskonałym systemem do badania odpowiedzi komórkowych związanych z chorobami naczyniowymi, takimi jak miażdżyca, nadciśnienie i zakrzepica. Co więcej, ich reakcja na naprężenia ścinające może być badana w dynamicznych modelach przepływu, zapewniając wgląd w wpływ przepływu krwi na zachowanie śródbłonka.
W badaniach farmakologicznych HUVEC są powszechnie wykorzystywane do oceny skuteczności i toksyczności środków ukierunkowanych na naczynia krwionośne. Ich prosta izolacja i względna łatwość hodowli sprawiają, że są one cennym narzędziem zarówno w badaniach akademickich, jak i rozwoju farmaceutycznym. Atrybuty te podkreślają znaczenie HUVEC w pogłębianiu naszej wiedzy na temat zdrowia i chorób naczyń krwionośnych.
- Chusteczka
- Żyła pępowinowa
- Zastosowania
- Ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC) są szeroko stosowane w różnych obszarach badań biomedycznych, ponieważ mogą szybko proliferować i różnicować się w różne typy komórek śródbłonka, które wyściełają naczynia krwionośne. HUVEC mają wiele zastosowań w badaniach i odkrywaniu leków, w tym w gojeniu ran, angiogenezie, inżynierii tkankowej, stanach zapalnych, onkologii, farmakologii, modelowaniu naczyń krwionośnych i transfekcji.
- Synonimy
- HUVEC
- Human umbilical vein endothelial cells
- provitro 1210111
02Darczyńca
- Wiek dawcy
- Newborn (umbilical cord)
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
03Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Specyficzne dla partii
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
04Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Śródbłonek
- Typ komórki
- Komórki pierwotne
- Nowotworotwórczy
- No
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Pożywka do wzrostu komórek śródbłonka (numer artykułu PromoCell C-22010)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- More than 6,000 cells/cm²
- Odnawianie płynów
- Co 2 do 3 dni
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Rozmrażanie i hodowla
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Ekspresja i podatność
- Antygeny powierzchniowe
- CD31⁺, CD105⁺
- Ekspresja białek
- Cytoplazmatyczny VWF/czynnik VIII > 95% dodatni wynik immunofluorescencji. Cytoplazmatyczny wychwyt Di-I-Ac-LDL > 95% dodatni w badaniu immunofluorescencyjnym. Cytoplazmatyczny PECAM1 > 95% dodatni w badaniu immunofluorescencyjnym
- Wirusy
- Ujemny wynik testów na obecność HIV-1, HBV i HCV
08Identyfikatory
- Źródło
- HUVEC, połączone (numer katalogowy Cytion 300605)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak