Przejdź do treści
HUVEC
Chusteczka
Żyła pępowinowa
Synonimy
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Dokumenty

HUVEC

Primary cell · Numer produktu 300605

Wszechstronny model do badań nad śródbłonkiem i układem naczyniowym

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC) są pierwotnymi komórkami pochodzącymi z warstwy śródbłonka żył w ludzkiej pępowinie. HUVEC są kluczowym modelem w badaniach nad biologią naczyń krwionośnych ze względu na ich zdolność do dokładnego odtworzenia wielu aspektów biologii komórek śródbłonka in vivo. Komórki te są szeroko wykorzystywane do badania funkcji śródbłonka, w tym angiogenezy, stanu zapalnego i mechanizmów przepuszczalności naczyń.

HUVEC wykazują kilka krytycznych markerów śródbłonka, takich jak czynnik von Willebranda, CD31 i śródbłonkowa syntaza tlenku azotu (eNOS), które potwierdzają ich śródbłonkowe pochodzenie i funkcjonalność. Są one również zdolne do tworzenia struktur przypominających rurki podczas hodowli na Matrigelu, co wskazuje na ich potencjał w badaniach nad angiogenezą.

Zdolność HUVEC do reagowania na cytokiny i czynniki wzrostu czyni je doskonałym systemem do badania odpowiedzi komórkowych związanych z chorobami naczyniowymi, takimi jak miażdżyca, nadciśnienie i zakrzepica. Co więcej, ich reakcja na naprężenia ścinające może być badana w dynamicznych modelach przepływu, zapewniając wgląd w wpływ przepływu krwi na zachowanie śródbłonka.

W badaniach farmakologicznych HUVEC są powszechnie wykorzystywane do oceny skuteczności i toksyczności środków ukierunkowanych na naczynia krwionośne. Ich prosta izolacja i względna łatwość hodowli sprawiają, że są one cennym narzędziem zarówno w badaniach akademickich, jak i rozwoju farmaceutycznym. Atrybuty te podkreślają znaczenie HUVEC w pogłębianiu naszej wiedzy na temat zdrowia i chorób naczyń krwionośnych.

Chusteczka
Żyła pępowinowa
Zastosowania
Ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC) są szeroko stosowane w różnych obszarach badań biomedycznych, ponieważ mogą szybko proliferować i różnicować się w różne typy komórek śródbłonka, które wyściełają naczynia krwionośne. HUVEC mają wiele zastosowań w badaniach i odkrywaniu leków, w tym w gojeniu ran, angiogenezie, inżynierii tkankowej, stanach zapalnych, onkologii, farmakologii, modelowaniu naczyń krwionośnych i transfekcji.
Synonimy
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Darczyńca

Wiek dawcy
Newborn (umbilical cord)
Pochodzenie etniczne
Kaukaski

03Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Specyficzne dla partii
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

04Cechy charakterystyczne

Morfologia
Śródbłonek
Typ komórki
Komórki pierwotne
Nowotworotwórczy
No

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka do wzrostu komórek śródbłonka (numer artykułu PromoCell C-22010)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
More than 6,000 cells/cm²
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrażanie i hodowla
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Ekspresja i podatność

Antygeny powierzchniowe
CD31⁺, CD105⁺
Ekspresja białek
Cytoplazmatyczny VWF/czynnik VIII > 95% dodatni wynik immunofluorescencji. Cytoplazmatyczny wychwyt Di-I-Ac-LDL > 95% dodatni w badaniu immunofluorescencyjnym. Cytoplazmatyczny PECAM1 > 95% dodatni w badaniu immunofluorescencyjnym
Wirusy
Ujemny wynik testów na obecność HIV-1, HBV i HCV

08Identyfikatory

Źródło
HUVEC, połączone (numer katalogowy Cytion 300605)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606