Prejsť na obsah
HUVEC
Tkanivo
Pupočníková žila
Synonymá
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Dokumenty

HUVEC

Primary cell · Číslo výrobku 300605

Univerzálny model pre výskum endotelu a ciev

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Endotelové bunky ľudskej pupočníkovej žily (HUVEC) sú primárne bunky odvodené z endotelovej vrstvy žíl v ľudskej pupočníkovej žile. HUVEC sú kľúčovým modelom vo výskume cievnej biológie vďaka svojej schopnosti verne kopírovať mnohé aspekty biológie endotelových buniek in vivo. Tieto bunky sa vo veľkej miere využívajú na štúdium endotelových funkcií vrátane angiogenézy, zápalu a mechanizmov cievnej priepustnosti.

HUVEC vykazujú niekoľko kritických endotelových markerov, ako sú von Willebrandov faktor, CD31 a endotelová syntáza oxidu dusnatého (eNOS), ktoré potvrdzujú ich endotelový pôvod a funkčnosť. Pri kultivácii na Matrigely sú tiež schopné vytvárať štruktúry podobné trubiciam, čo dokazuje ich potenciál pre štúdie angiogenézy.

Schopnosť HUVEC reagovať na cytokíny a rastové faktory z nich robí vynikajúci systém na skúmanie bunkových reakcií spojených s cievnymi ochoreniami, ako sú ateroskleróza, hypertenzia a trombóza. Okrem toho sa ich reakcia na strihové napätie môže študovať v dynamických modeloch prúdenia, čo umožňuje nahliadnuť do účinkov prúdenia krvi na správanie endotelu.

Vo farmakologickom výskume sa HUVEC bežne používajú na hodnotenie účinnosti a toxicity látok zameraných na cievy. Ich jednoduchá izolácia a relatívne jednoduchá kultivácia z nich robí cenný nástroj v akademickom výskume aj vo farmaceutickom vývoji. Tieto vlastnosti podčiarkujú význam HUVEC pri zlepšovaní nášho chápania cievneho zdravia a chorôb.

Tkanivo
Pupočníková žila
Aplikácie
Endotelové bunky ľudskej pupočníkovej žily (HUVEC) sa široko používajú v rôznych oblastiach biomedicínskeho výskumu, pretože sa dokážu rýchlo množiť a diferencovať na rôzne typy endotelových buniek, ktoré vystielajú cievy. HUVEC majú mnoho aplikácií vo výskume a pri objavovaní liekov vrátane hojenia rán, angiogenézy, tkanivového inžinierstva, zápalu, onkológie, farmakológie, modelovania ciev a transfekcie.
Synonymá
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Darca

Vek darcu
Newborn (umbilical cord)
Etnická príslušnosť
Kaukazský

03Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Špecifické pre danú šaržu
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

04Charakteristiky

Morfológia
Endotel
Typ bunky
Primárne bunky
Tumorigenický
No

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Rastové médium pre endotelové bunky (číslo výrobku PromoCell C-22010)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
More than 6,000 cells/cm²
Obnova kvapaliny
Každé 2 až 3 dni
Zotavenie po rozmrazení

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Prejav a náchylnosť

Povrchové antigény
CD31⁺, CD105⁺
Expresia proteínov
Cytosplazmatický VWF/faktor VIII > 95 % pozitívny pri imunofluorescencii. Cytoplazmatické vychytávanie Di-I-Ac-LDL > 95 % pozitívne imunofluorescenčne. Cytoplazmatický PECAM1 > 95 % pozitívny imunofluorescenčne
Vírusy
Negatívne na HIV-1, HBV a HCV

08Identifikátory

Citácia
HUVEC, združené (katalógové číslo Cytion 300605)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606