Ga naar de inhoud
HUVEC
Weefsel
Navelstrengader
Synoniemen
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Documenten

HUVEC

Primary cell · Productnummer 300605

Veelzijdig model voor endotheel- en vaatonderzoek

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Humane navelstreng-endotheelcellen (HUVEC's) zijn primaire cellen afkomstig van de endotheellaag van aderen in de menselijke navelstreng. HUVECs zijn een centraal model in vasculair biologisch onderzoek vanwege hun vermogen om veel aspecten van de biologie van endotheelcellen in vivo na te bootsen. Deze cellen worden uitgebreid gebruikt om endotheelfuncties te bestuderen, waaronder angiogenese, ontsteking en mechanismen van vasculaire permeabiliteit.

HUVECs vertonen verschillende cruciale endotheelmarkers, zoals von Willebrand factor, CD31 en endotheliaal stikstofoxidesynthase (eNOS), wat hun endotheliale oorsprong en functionaliteit bevestigt. Ze zijn ook in staat buisachtige structuren te vormen wanneer ze gekweekt worden op Matrigel, wat hun potentieel voor angiogenesestudies aantoont.

Het vermogen van HUVECs om te reageren op cytokinen en groeifactoren maakt ze een uitstekend systeem voor het onderzoeken van cellulaire reacties die geassocieerd worden met vaatziekten zoals atherosclerose, hypertensie en trombose. Bovendien kan hun reactie op schuifspanning bestudeerd worden in dynamische stromingsmodellen, wat inzicht geeft in de effecten van bloedstroming op endotheelgedrag.

In farmacologisch onderzoek worden HUVECs vaak gebruikt om de werkzaamheid en toxiciteit van vasculaire doelwitten te evalueren. Door hun eenvoudige isolatie en relatief eenvoudige kweek zijn ze een waardevol hulpmiddel voor zowel academisch onderzoek als farmaceutische ontwikkeling. Deze eigenschappen onderstrepen het belang van HUVECs voor een beter begrip van vasculaire gezondheid en ziekte.

Weefsel
Navelstrengader
Toepassingen
Humane navelstreng-endotheelcellen (HUVEC's) worden veel gebruikt in verschillende biomedische onderzoeksgebieden omdat ze snel kunnen woekeren en differentiëren in verschillende soorten endotheelcellen, die bloedvaten bekleden. HUVECs hebben veel onderzoeks- en medicijnontdekkingstoepassingen, waaronder wondgenezing, angiogenese, weefselmanipulatie, ontsteking, oncologie, farmacologie, vasculaire modellering en transfectie.
Synoniemen
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Donateur

Leeftijd van de donor
Newborn (umbilical cord)
Etnische afkomst
Kaukasisch

03Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Lot-specifiek
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

04Kenmerken

Morfologie
Endotheel
Celtype
Primaire cellen
Tumorverwekkend
No

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
Endotheelcelgroeimedium (PromoCell artikelnummer C-22010)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
More than 6,000 cells/cm²
Vloeistofverversing
Om de 2 tot 3 dagen
Herstel na ontdooiing

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Ontdooien en kweken
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
CD31⁺, CD105⁺
Eiwit-expressie
Cytoplasmatisch VWF/Factor VIII > 95% positief door immunofluorescentie. Cytoplasmatische opname van Di-I-Ac-LDL > 95% positief door immunofluorescentie. Cytoplasmatisch PECAM1 > 95% positief door immunofluorescentie
Virussen
Negatief voor HIV-1, HBV en HCV

08Identificatiegegevens

Bronvermelding
HUVEC, samengevoegd (Cytion catalogusnummer 300605)
NCBI-belastingnummer
9606