Mine otse sisu juurde
HUVEC
Kude
Nabaveeni
Sünonüümid
HUVEC, Human umbilical vein endothelial cells, provitro 1210111

Dokumendid

HUVEC

Primary cell · Toote number 300605

Mitmekülgne mudel endoteeli- ja veresoonte uuringuteks

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese nabaveeni endoteelirakud (HUVEC) on inimese nabanööri veenide endoteelikihist saadud primaarsed rakud. HUVECid on vaskulaarbioloogiliste uuringute keskne mudel, kuna nad suudavad lähedalt jäljendada paljusid endoteelirakkude bioloogia aspekte in vivo. Neid rakke kasutatakse laialdaselt endoteeli funktsioonide, sealhulgas angiogeneesi, põletiku ja veresoonte läbilaskvuse mehhanismide uurimiseks.

HUVEC-del on mitmeid kriitilisi endoteeli markereid, nagu von Willebrandi faktor, CD31 ja endoteeli lämmastikoksiidi süntaas (eNOS), mis kinnitavad nende endoteeli päritolu ja funktsionaalsust. Nad on ka võimelised moodustama Matrigelil kasvatamisel torukujulisi struktuure, mis näitab nende potentsiaali angiogeneesi uuringutes.

HUVECide võime reageerida tsütokiinidele ja kasvufaktoritele muudab nad suurepäraseks süsteemiks veresoonkonna reaktsioonide uurimiseks, mis on seotud selliste veresoonkonna haigustega nagu ateroskleroos, hüpertensioon ja tromboos. Lisaks saab nende reaktsiooni nihkepingele uurida dünaamilistes voolumudelites, mis annab ülevaate verevoolu mõjust endoteeli käitumisele.

Farmakoloogilistes uuringutes kasutatakse HUVEC-e tavaliselt vaskulaarsete sihtmaterjalide tõhususe ja toksilisuse hindamiseks. Nende lihtne isoleerimine ja kasvatamise suhteline lihtsus muudavad nad väärtuslikuks vahendiks nii akadeemilistes uuringutes kui ka farmaatsiaarenduses. Need omadused rõhutavad HUVECide tähtsust meie arusaamade edendamisel veresoonte tervisest ja haigustest.

Kude
Nabaveeni
Rakendused
Inimese nabaveeni endoteelirakke (HUVEC) kasutatakse laialdaselt erinevates biomeditsiini uurimisvaldkondades, sest nad suudavad kiiresti paljuneda ja diferentseeruda erinevat tüüpi endoteelirakkudeks, mis vooderdavad veresooni. HUVEC-del on palju rakendusi teadusuuringutes ja ravimite avastamisel, sealhulgas haavade paranemine, angiogenees, koetehnoloogia, põletik, onkoloogia, farmakoloogia, veresoonte modelleerimine ja transfektsioon.
Sünonüümid
  • HUVEC
  • Human umbilical vein endothelial cells
  • provitro 1210111

02Annetaja

Doonori vanus
Newborn (umbilical cord)
Etniline kuuluvus
Kaukaasia

03Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Kogupõhine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

04Omadused

Morfoloogia
Endoteeli
Rakutüüp
Esmased rakud
Tuumorigeenne
No

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Endoteelirakkude kasvukeskkond (PromoCell artikli number C-22010)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
More than 6,000 cells/cm²
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Endothelial Cell Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 6,000 cells/cm².

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
CD31⁺, CD105⁺
Valgu ekspressioon
Tsütosplasmaatiline VWF/ VIII faktor > 95% positiivsed immunofluorestsentsiga. Di-I-Ac-LDL tsütoplasmiline ülesvõtmine > 95% positiivne immunofluorestsentsiga. Tsütoplasma PECAM1 > 95% positiivsed immunofluorestsentsiga
Viirused
HIV-1, HBV ja HCV suhtes negatiivne

08Tunnused

Viide
HUVEC, koondatud (Cytioni katalooginumber 300605)
NCBI maksukood
9606