Skip to content
RAW 264.7
Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว
Synonyms
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Documents

RAW 264.7

Cell line · Product number 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ RAW 264.7 เป็นสายพันธุ์เซลล์แมคโครฟาจของหนูที่ถูกใช้กันอย่างแพร่หลาย ซึ่งได้มาจากน้ำในช่องท้องของหนูเพศผู้ที่มีเนื้องอกซึ่งเกิดจากไวรัส Abelson murine leukemia และมักใช้ในการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันและโรคติดเชื้อ เนื่องจากเป็นเซลล์สายพันธุ์ที่ไม่มีอายุขัย เซลล์ RAW264.7 จึงเป็นระบบแบบจำลองสำคัญสำหรับการศึกษาชีววิทยาของแมคโครฟาจ รวมถึงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเชื้อโรค การถ่ายทอดสัญญาณ และการแสดงออกของยีน

เซลล์ RAW264.7 มีคุณค่าอย่างยิ่งเนื่องจากความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์คล้ายแมคโครฟาจ เซลล์เหล่านี้สามารถถูกกระตุ้นให้กลายเป็นแมคโครฟาจชนิด M1 ซึ่งเกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อการอักเสบ หรือแมคโครฟาจชนิด M2 ซึ่งเชื่อมโยงกับการซ่อมแซมเนื้อเยื่อและกระบวนการต้านการอักเสบความสามารถในการแบ่งขั้วนี้ ควบคู่กับความสามารถในการทำหน้าที่สำคัญของแมคโครฟาจ เช่น การดูดซึมสารเข้าเซลล์และการกินเซลล์หรือสิ่งแปลกปลอม ช่วยเน้นย้ำถึงความสำคัญของแมคโครฟาจในการศึกษาชีววิทยาของแมคโครฟาจและปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันกับเชื้อโรค

เซลล์ RAW 264.7 มีบทบาทสำคัญในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ของระบบภูมิคุ้มกันกับปัจจัยต่าง ๆ รวมถึงเชื้อโรคและชีววิทยาของกระดูก เซลล์ RAW264.7 สามารถถูกเหนี่ยวนำให้เปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์คล้ายออสทีโอคลาสต์ภายใต้สภาวะที่เหมาะสม เช่น การได้รับ RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand) ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาบางแง่มุมของชีววิทยาออสทีโอคลาสต์และการสลายกระดูก

การตอบสนองของเซลล์ไลน์ RAW264.7 ต่อสิ่งกระตุ้นต่างๆ รวมถึงการเหนี่ยวนำให้เกิดไพโรพโทซิส ซึ่งเป็นกระบวนการตายของเซลล์ที่มีการอักเสบที่เกิดจากปัจจัยต่างๆ เช่น LPS (ลิโพโพลีแซ็กคาไรด์) มีบทบาทสำคัญในการแยกแยะเส้นทางที่นำไปสู่การผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ผลกระทบของสภาวะแวดล้อม เช่น ระดับกลูโคสในนอกเซลล์ที่มีต่อหน้าที่ของเซลล์และฟีโนไทป์ ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับเมแทบอลิซึมของเซลล์และศักยภาพในการลดการตอบสนองต่อการอักเสบ

เซลล์ RAW264.7 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากมะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนูและมีบทบาทสำคัญในงานวิจัยด้านภูมิคุ้มกันวิทยา เป็นเครื่องมือสำคัญในการทำความเข้าใจชีววิทยาของแมคโครฟาจ พลวัตระหว่างระบบภูมิคุ้มกันกับเชื้อโรค ภูมิคุ้มกันกับโรคกระดูก และการตอบสนองต่อการอักเสบ ซึ่งเน้นย้ำถึงบทบาทที่ขาดไม่ได้ของเซลล์เหล่านี้ทั้งในงานวิจัยพื้นฐานและประยุกต์ทางชีวการแพทย์

Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว
Synonyms
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Cell type
มาโครฟาจ
Doubling time
เซลล์ RAW264.7 แสดงเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าในช่วงตั้งแต่ 11 ถึง 30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
RAW 264.7 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400319)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
อิมมูโนโกลบูลิน (เอฟซี), คอมเพล็กซ์ (ซี3)
Antigen expression
H-2d
Viruses
เซลล์ไลน์ได้รับการทดสอบและพบว่ามีผลบวกต่อกิจกรรมของเอนไซม์ Reverse Transcriptase (RT) จากเชื้อไวรัสเรโทรไวรัสชนิด C ในน้ำซุปเลี้ยงเซลล์และสารสกัดจากเซลล์ อาจมีการหลั่งไวรัส Ectromelia (ไข้ฝีดาษหนู)
Products
ไลโซไซม์

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
เซลล์ที่มีแรงยึดเกาะสูง, การใช้ที่ขูดเซลล์
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
4 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
ผู้ใหญ่