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RAW 264.7
Tissu
Ascite
Maladie
Leucémie
Synonymes
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

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RAW 264.7

Cell line · Référence du produit 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules RAW 264.7 sont une lignée cellulaire de macrophages murins largement utilisée, dérivée des ascites d'une souris mâle atteinte d'une tumeur induite par le virus de la leucémie murine d'Abelson. Elles sont couramment utilisées dans la recherche sur l'immunologie et les maladies infectieuses. En tant que lignée cellulaire immortalisée, les cellules RAW264.7 constituent un système modèle essentiel pour l'étude de la biologie des macrophages, y compris les réponses immunitaires aux pathogènes, la transduction des signaux et l'expression des gènes.

Les cellules RAW264.7 sont particulièrement précieuses pour leur capacité à se différencier en cellules semblables à des macrophages. Ces cellules peuvent être polarisées en macrophages M1, associés aux réponses inflammatoires, ou en macrophages M2, liés à la réparation des tissus et aux processus anti-inflammatoires. Cette capacité de polarisation, ainsi que leur aptitude à exécuter des fonctions essentielles des macrophages telles que la pinocytose et la phagocytose, souligne leur importance dans l'étude de la biologie des macrophages et de l'interaction complexe entre les réponses immunitaires et les agents pathogènes.

Les cellules RAW 264.7 jouent un rôle essentiel dans l'étude des interactions du système immunitaire avec divers facteurs, notamment les agents pathogènes et la biologie osseuse. Les cellules RAW264.7 peuvent être amenées à se différencier en cellules de type ostéoclaste dans certaines conditions, telles que l'exposition au RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), ce qui en fait un modèle pour l'étude de certains aspects de la biologie des ostéoclastes et de la résorption osseuse.

La réponse de la lignée cellulaire RAW264.7 à divers stimuli, y compris l'induction de la pyroptose, un processus de mort cellulaire inflammatoire déclenché par des facteurs tels que le LPS (lipopolysaccharide), permet de disséquer les voies menant à la production de cytokines inflammatoires. L'impact des conditions environnementales, telles que les niveaux de glucose extracellulaire sur la fonction et le phénotype des cellules, permet de mieux comprendre le métabolisme cellulaire et la régulation négative potentielle des réponses inflammatoires.

Les cellules RAW264.7, qui proviennent de la leucémie murine et sont largement utilisées dans la recherche immunologique, constituent un outil crucial pour faire progresser notre compréhension de la biologie des macrophages, de la dynamique entre le système immunitaire et les pathogènes, de l'ostéo-immunologie et des réponses inflammatoires, soulignant leur rôle indispensable dans la recherche biomédicale fondamentale et appliquée.

Tissu
Ascite
Maladie
Leucémie
Synonymes
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Type de cellule
Macrophage
Temps de doublement
Les cellules RAW264.7 présentent un temps de doublement allant de 11 à 30 heures

04Identifiants

Référence
RAW 264.7 (numéro de catalogue Cytion 400319)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Immunoglobuline (Fc), complément (C3)
Expression des antigènes
H-2d
Virus
La lignée cellulaire a été testée et s'est révélée positive pour l'activité de la transcriptase inverse (RT) des rétrovirus de type C dans le surnageant de culture cellulaire et l'extrait cellulaire. Le virus Ectromelia (mousepox) peut être sécrété.
Produits
Lysozyme

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Cellules fortement adhésives, utilisation d'un grattoir à cellules
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c
Âge du donneur
Adulte