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RAW 264.7
Gewebe
Aszites
Krankheit
Leukämie
Synonyme
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

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RAW 264.7

Cell line · Artikelnummer 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

RAW 264.7-Zellen sind eine weit verbreitete murine Makrophagen-Zelllinie, die aus dem Aszites einer männlichen Maus mit einem durch das Abelson-Mausleukämievirus induzierten Tumor gewonnen wird und häufig in der immunologischen und infektiologischen Forschung eingesetzt wird. Als immortalisierte Zelllinie sind RAW264.7-Zellen ein wichtiges Modellsystem für die Untersuchung der Makrophagenbiologie, einschließlich Immunreaktionen auf Krankheitserreger, Signaltransduktion und Genexpression.

RAW264.7-Zellen sind besonders wertvoll aufgrund ihrer Fähigkeit, sich in makrophagenähnliche Zellen zu differenzieren. Diese Zellen können in M1-Makrophagen, die an Entzündungsreaktionen beteiligt sind, oder M2-Makrophagen, die an der Gewebereparatur und entzündungshemmenden Prozessen beteiligt sind, polarisiert werden. Diese Fähigkeit zur Polarisierung sowie ihre Fähigkeit, wesentliche Makrophagenfunktionen wie Pinozytose und Phagozytose auszuführen, unterstreicht ihre Bedeutung für die Untersuchung der Makrophagenbiologie und des komplexen Zusammenspiels zwischen Immunreaktionen und Krankheitserregern.

RAW 264.7-Zellen sind von entscheidender Bedeutung für die Untersuchung der Interaktionen des Immunsystems mit verschiedenen Faktoren, einschließlich Krankheitserregern und Knochenbiologie. RAW264.7-Zellen können unter bestimmten Bedingungen, wie z. B. der Exposition gegenüber RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), zur Differenzierung in osteoklastenähnliche Zellen veranlasst werden, was sie zu einem Modell für die Untersuchung bestimmter Aspekte der Osteoklastenbiologie und der Knochenresorption macht.

Die Reaktion der RAW264.7-Zelllinie auf verschiedene Stimuli, einschließlich der Induktion von Pyroptose, einem entzündlichen Zelltodprozess, der durch Faktoren wie LPS (Lipopolysaccharid) ausgelöst wird, ist entscheidend für die Untersuchung der Wege, die zur Produktion von Entzündungszytokinen führen. Die Auswirkungen von Umweltbedingungen, wie z. B. dem extrazellulären Glukosespiegel, auf die Zellfunktion und den Phänotyp, bieten Einblicke in den Zellstoffwechsel und die mögliche Herunterregulierung von Entzündungsreaktionen.

RAW264.7-Zellen, die ihren Ursprung in der Leukämie der Maus haben und in der immunologischen Forschung umfassend eingesetzt werden, sind ein wichtiges Instrument, um unser Verständnis der Makrophagenbiologie, der Dynamik zwischen Immunsystem und Krankheitserreger, der Osteoimmunologie und der Entzündungsreaktionen zu verbessern, was ihre unverzichtbare Rolle in der biomedizinischen Grundlagen- und Anwendungsforschung unterstreicht.

Gewebe
Aszites
Krankheit
Leukämie
Synonyme
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Zelltyp
Makrophagen
Verdopplungszeit
RAW264.7-Zellen weisen eine Verdopplungszeit von 11 bis 30 Stunden auf

04Bezeichner

Quellenangabe
RAW 264.7 (Cytion-Katalognummer 400319)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Immunglobulin (Fc), Komplement (C3)
Antigenexpression
H-2d
Viren
Die Zelllinie wurde getestet und positiv auf Reverse-Transkriptase (RT)-Aktivität von C-Typ-Retroviren im Zellkulturüberstand und Zellextrakt befunden. Das Ectromelia-Virus (Mauspocken) kann sezerniert werden.
Produkte
Lysozym

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Stark haftende Zellen, Verwendung von Zellschabern
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
4 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BALB/c
Alter des Spenders
Erwachsener