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RAW 264.7
Tissue
Ascite
Disease
Leucémie
Synonyms
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

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RAW 264.7

Cell line · Product number 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

Les cellules RAW 264.7 constituent une lignée cellulaire de macrophages murins largement utilisée, dérivée de l’ascite d’une souris mâle atteinte d’une tumeur induite par le virus de la leucémie murine d’Abelson; elles sont couramment employées dans la recherche en immunologie et en maladies infectieuses. En tant que lignée cellulaire immortalisée, les cellules RAW 264.7 constituent un système modèle essentiel pour l’étude de la biologie des macrophages, notamment les réponses immunitaires aux agents pathogènes, la transduction du signal et l’expression génique.

Les cellules RAW264.7 sont particulièrement précieuses en raison de leur capacité à se différencier en cellules de type macrophage. Ces cellules peuvent être polarisées en macrophages de type M1, associés aux réponses inflammatoires, ou en macrophages de type M2, liés à la réparation tissulaire et aux processus anti-inflammatoires. Cette capacité de polarisation, combinée à leur aptitude à remplir des fonctions essentielles des macrophages telles que la pinocytose et la phagocytose, souligne leur importance dans l’étude de la biologie des macrophages et des interactions complexes entre les réponses immunitaires et les agents pathogènes.

Les cellules RAW 264.7 jouent un rôle déterminant dans l’étude des interactions du système immunitaire avec divers facteurs, notamment les agents pathogènes et la biologie osseuse. Les cellules RAW 264.7 peuvent être amenées à se différencier en cellules de type ostéoclastes dans certaines conditions, telles que l’exposition au RANKL (ligand activateur du récepteur du facteur nucléaire κB), ce qui en fait un modèle pour l’étude de certains aspects de la biologie des ostéoclastes et de la résorption osseuse.

La réponse de la lignée cellulaire RAW 264.7 à divers stimuli, y compris l’induction de la pyroptose — un processus de mort cellulaire inflammatoire déclenché par des facteurs tels que le LPS (lipopolysaccharide) —, est essentielle pour analyser les voies menant à la production de cytokines inflammatoires. L’impact des conditions environnementales, telles que les concentrations extracellulaires de glucose, sur la fonction et le phénotype cellulaires, permet de mieux comprendre le métabolisme cellulaire et la régulation à la baisse potentielle des réponses inflammatoires.

Les cellules RAW264.7, issues d’une leucémie murine et largement utilisées dans la recherche immunologique, constituent un outil essentiel pour faire progresser notre compréhension de la biologie des macrophages, de la dynamique entre le système immunitaire et les agents pathogènes, de l’ostéo-immunologie et des réponses inflammatoires, soulignant ainsi leur rôle indispensable tant dans la recherche biomédicale fondamentale qu’appliquée.

Tissue
Ascite
Disease
Leucémie
Synonyms
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Cell type
Macrophage
Doubling time
Les cellules RAW264.7 présentent un temps de doublement compris entre 11 et 30 heures

04Identifiers

Citation
RAW 264.7 (numéro de catalogue Cytion 400319)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Immunoglobuline (Fc), complément (C3)
Antigen expression
H-2d
Viruses
La lignée cellulaire a été testée et s’est révélée positive à l’activité de la transcriptase inverse (TI) des rétrovirus de type C, tant dans le surnageant de culture cellulaire que dans l’extrait cellulaire. Le virus de l’ectromélie (variole de la souris) pourrait être sécrété.
Products
Lysozyme

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Cellules très adhérentes, utilisation d’un grattoir à cellules
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Adulte