Премини към съдържанието
RAW 264.7
Тъкан
Асцит
Заболяване
Левкемия
Синоними
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Документи

RAW 264.7

Cell line · Номер на продукта 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките RAW 264.7 са широко използвана клетъчна линия от миши макрофаги, получена от асцита на мъжка мишка с тумор, индуциран от вируса на мишата левкемия на Абелсон, и се използват често в имунологични и инфекциозни изследвания. Като имортализирана клетъчна линия, клетките RAW264.7 са ключова моделна система за изследване на макрофагиалната биология, включително имунните реакции към патогени, сигналната трансдукция и генната експресия.

Клетките RAW264.7 са особено ценни поради способността им да се диференцират в макрофагоподобни клетки. Тези клетки могат да се поляризират в макрофаги М1, свързани с възпалителни реакции, или макрофаги М2, свързани с възстановяването на тъканите и противовъзпалителните процеси. Тази способност за поляризация, заедно със способността им да изпълняват основни макрофагиални функции като пиноцитоза и фагоцитоза, подчертава значението им за изучаване на макрофагиалната биология и сложното взаимодействие между имунните реакции и патогените.

Клетките RAW 264.7 са от съществено значение за изучаване на взаимодействието на имунната система с различни фактори, включително патогени и костна биология. Клетките RAW264.7 могат да бъдат индуцирани да се диференцират в остеокластоподобни клетки при определени условия, като например излагане на RANKL (рецепторен активатор на лиганда на ядрения фактор κB), което ги прави модел за изучаване на определени аспекти на биологията на остеокластите и костната резорбция.

Реакцията на клетъчната линия RAW264.7 на различни стимули, включително индуциране на пироптоза - възпалителен процес на клетъчна смърт, предизвикан от фактори като LPS (липополизахарид), е от съществено значение за разчленяване на пътищата, водещи до производството на възпалителни цитокини. Влиянието на условията на околната среда, като например нивата на извънклетъчната глюкоза върху клетъчната функция и фенотип, предлага прозрения за клетъчния метаболизъм и потенциалното намаляване на регулацията на възпалителните реакции.

Клетките RAW264.7, произхождащи от миша левкемия и широко използвани в имунологичните изследвания, служат като важен инструмент за подобряване на разбирането ни за биологията на макрофагите, динамиката на имунната система и патогените, остеоимунологията и възпалителните реакции, като подчертават незаменимата си роля както във фундаменталните, така и в приложните биомедицински изследвания.

Тъкан
Асцит
Заболяване
Левкемия
Синоними
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Тип клетка
Макрофаги
Време за удвояване
Клетките RAW264.7 имат време за удвояване от 11 до 30 часа

04Идентификатори

Източник
RAW 264.7 (каталожен номер 400319 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_0493

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Имуноглобулин (Fc), комплемент (C3)
Експресия на антигена
H-2d
Вируси
Клетъчната линия е тествана и е установена положителна активност на обратна транскриптаза (RT) от ретровируси от тип С в супернатантата на клетъчната култура и клетъчния екстракт. Възможно е да се отделя вирус на ектромелия (миша едра шарка).
Продукти
Лизозим

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Силно залепващи клетки, използване на клетъчна стъргалка
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
Възрастни