الانتقال إلى المحتوى
RAW 264.7
الأنسجة
الاستسقاء
المرض
سرطان الدم (اللوكيميا)
المرادفات
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

المستندات

RAW 264.7

Cell line · رقم المنتج 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا RAW 264.7 خط خلايا بلعمية كبيرة مستخدمة على نطاق واسع مشتقة من استسقاء ذكر فأر مصاب بورم مستحث بفيروس ابيضاض الدم الفيروسي أبيلسون الفيروسي، وتُستخدم عادةً في أبحاث الأمراض المناعية والمعدية. تُعد خلايا RAW264.7 نظامًا نموذجيًا رئيسيًا لدراسة بيولوجيا البلاعم، بما في ذلك الاستجابات المناعية لمسببات الأمراض ونقل الإشارات والتعبير الجيني، باعتبارها خطًا خلويًا غير خالد.

تُعد خلايا RAW264.7 ذات قيمة خاصة لقدرتها على التمايز إلى خلايا شبيهة بالخلايا البلعمية الكبيرة. يمكن استقطاب هذه الخلايا إلى خلايا بلعمية كبيرة M1 المرتبطة بالاستجابات الالتهابية، أو خلايا بلعمية كبيرة M2 المرتبطة بإصلاح الأنسجة والعمليات المضادة للالتهابات. تؤكد هذه القدرة على الاستقطاب، إلى جانب قدرتها على أداء وظائف البلاعم الأساسية مثل التكتل الدبوسي والبلعمة، على أهميتها في دراسة بيولوجيا البلاعم والتفاعل المعقد بين الاستجابات المناعية ومسببات الأمراض.

وتؤدي خلايا RAW 264.7 دورًا أساسيًا في دراسة تفاعلات الجهاز المناعي مع عوامل مختلفة، بما في ذلك مسببات الأمراض وبيولوجيا العظام. يمكن تحريض خلايا RAW264.7 على التمايز إلى خلايا شبيهة بخلايا ناقضات العظام في ظل ظروف معينة، مثل التعرض لـ RANKL (مستقبلات منشط العامل النووي κB Ligand)، مما يجعلها نموذجًا لدراسة جوانب معينة من بيولوجيا ناقضات العظام وارتشاف العظام.

تُعد استجابة خط خلايا RAW264.7 لمختلف المحفزات، بما في ذلك تحريض البيروبتوزيسيس (pyroptosis)، وهي عملية موت الخلايا الالتهابية التي تحفزها عوامل مثل LPS (عديد السكاريد الدهني)، مفيدة في تشريح المسارات التي تؤدي إلى إنتاج السيتوكينات الالتهابية. يوفر تأثير الظروف البيئية، مثل مستويات الجلوكوز خارج الخلية على وظيفة الخلية ونمطها الظاهري، رؤى حول الأيض الخلوي وإمكانية خفض تنظيم الاستجابات الالتهابية.

تُعد خلايا RAW264.7، التي تعود أصولها إلى سرطان الدم لدى الفئران واستخدامها المكثف في الأبحاث المناعية، بمثابة أداة حاسمة في تعزيز فهمنا لبيولوجيا البلاعم، وديناميكيات الجهاز المناعي ومسببات الأمراض، وعلم المناعة العظمية، والاستجابات الالتهابية، مما يسلط الضوء على دورها الذي لا غنى عنه في كل من البحوث الطبية الحيوية الأساسية والتطبيقية.

الأنسجة
الاستسقاء
المرض
سرطان الدم (اللوكيميا)
المرادفات
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

نوع الخلية
البلاعم
زمن المضاعفة
تُظهر خلايا RAW264.7 زمن تضاعف يتراوح من 11 إلى 30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
RAW 264.7 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 400319)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0493

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
الغلوبولين المناعي (Fc)، المكمل (C3)
التعبير عن المستضد
ح-2د
الفيروسات
تم اختبار خط الخلية ووجد أنه إيجابي لنشاط إنزيم النسخ العكسي (RT) من الفيروسات القهقرية من النوع C في المادة الطافية المستنبتة في الخلية ومستخلص الخلية. قد يفرز فيروس إكتروميليا (جدري الفأر).
المنتجات
الليزوزيم

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
خلايا شديدة الالتصاق، استخدام مكشطة الخلايا
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
4 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
للبالغين