Ga naar de inhoud
RAW 264.7
Weefsel
Ascites
Ziekte
Leukemie
Synoniemen
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Documenten

RAW 264.7

Cell line · Productnummer 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

RAW 264.7-cellen zijn een veelgebruikte muizenmacrofaagcellijn die is afgeleid van de ascites van een mannelijke muis met een tumor die is geïnduceerd door het Abelson muizenleukemievirus en die veel wordt gebruikt bij immunologisch onderzoek en onderzoek naar infectieziekten. Als geïmmortaliseerde cellijn zijn RAW264.7-cellen een belangrijk modelsysteem voor het bestuderen van macrofaagbiologie, waaronder immuunreacties op pathogenen, signaaltransductie en genexpressie.

RAW264.7 cellen zijn vooral waardevol vanwege hun vermogen om te differentiëren in macrofaagachtige cellen. Deze cellen kunnen gepolariseerd worden in M1 macrofagen, geassocieerd met ontstekingsreacties, of M2 macrofagen, gekoppeld aan weefselherstel en ontstekingsremmende processen. Deze polarisatiecapaciteit, samen met hun vermogen om essentiële macrofaagfuncties uit te voeren zoals pinocytose en fagocytose, onderstreept hun relevantie voor het bestuderen van macrofaagbiologie en de complexe wisselwerking tussen immuunreacties en ziekteverwekkers.

RAW 264.7 cellen zijn essentieel bij het bestuderen van de interacties van het immuunsysteem met verschillende factoren, waaronder pathogenen en botbiologie. RAW264.7 cellen kunnen worden geïnduceerd om te differentiëren in osteoclast-achtige cellen onder bepaalde omstandigheden, zoals blootstelling aan RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), waardoor ze een model zijn voor het bestuderen van bepaalde aspecten van osteoclast-biologie en botresorptie.

De reactie van de RAW264.7 cellijn op verschillende stimuli, waaronder de inductie van pyroptose, een inflammatoir celdoodproces dat in gang wordt gezet door factoren zoals LPS (lipopolysaccharide), is van groot belang bij het ontleden van de routes die leiden tot de productie van inflammatoire cytokinen. De invloed van omgevingsfactoren, zoals extracellulaire glucosespiegels op de celfunctie en het fenotype, biedt inzicht in het cellulaire metabolisme en de mogelijke downregulatie van ontstekingsreacties.

RAW264.7 cellen, met hun oorsprong in muizenleukemie en hun uitgebreide gebruik in immunologisch onderzoek, dienen als een cruciaal instrument voor het bevorderen van ons begrip van macrofaagbiologie, de dynamiek van het immuunsysteem en pathogenen, osteoimmunologie en ontstekingsreacties, en benadrukken hun onmisbare rol in zowel fundamenteel als toegepast biomedisch onderzoek.

Weefsel
Ascites
Ziekte
Leukemie
Synoniemen
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Celtype
Macrofaag
Verdubbelingstijd
RAW264.7-cellen vertonen een verdubbelingstijd variërend van 11 tot 30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
RAW 264.7 (Cytion catalogusnummer 400319)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Immunoglobuline (Fc), complement (C3)
Antigeenexpressie
H-2d
Virussen
De cellijn werd getest en positief bevonden voor Reverse Transcriptase (RT)-activiteit van C-type retrovirussen in celkweeksupernatant en celextract. Ectromeliavirus (muispokken) kan worden uitgescheiden.
Producten
Lysozym

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Sterk klevende cellen, gebruik van celschraper
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
Volwassen