ETK-1

ETK-1 on ihmisen intrahepaattisen kolangiokarsinooman (IHCCA) solulinja, joka on alun perin perustettu sarkomatoidista kolangiokarsinoomasta kärsivän aikuispotilaan askitesnesteestä. Kasvain, josta ETK-1 on peräisin, sisälsi sekä tubulaarisen adenokarsinooman että sarkomatoidisia komponentteja, ja solulinja heijastaa sarkomatoidista fenotyyppiä. ETK-1-solut kasvavat kiinnittyneinä yhtenäisenä epiteelimonokerroksena, jolla on mukulakivimäinen ulkonäkö ja joka koostuu pääasiassa pienistä monikulmaisista soluista, joilla on pyöreät tai soikeat tumat ja selvästi erottuvat nukleolit. Varhaisvaiheen solujen populaation kaksinkertaistumisaika oli noin 70 tuntia, ja niillä oli hyperdiploidinen karyotyyppi, jonka modaalinen kromosomiluku oli 70:n puolivälissä, mikä on yhdenmukaista aggressiivisille sappiteiden pahanlaatuisille kasvaimille tyypillisen kromosomisen epävakauden kanssa.

Immunofenotyyppisesti ETK-1-solut ilmentävät sappiteiden epiteelimarkkereita, kuten γ-glutamyylitranspeptidaasia (GGT), sytokeratiinia 18 (CK18) ja sytokeratiinia 19 (CK19), mikä vahvistaa niiden kolangiokyyttisen alkuperän. Ne ovat negatiivisia hepatosyyttien merkkiaineille, kuten alfa-fetoproteiinille (AFP) ja albumiinille, perusolosuhteissa. ETK-1-solut ilmentävät vimentiiniä, mikä heijastaa niiden sarkomatoidisia ominaisuuksia ja osittaista mesenkymaalisia fenotyyppiä, mutta niiltä puuttuu karsinoembryonaalisen antigeenin (CEA) ja hiilihydraattiantigeeni 19-9:n (CA19-9) ilmentyminen. Tämä merkkiaineprofiili vastaa primaarituumorissa havaittua sarkomatoidista komponenttia ja korostaa piirteitä, jotka ovat yhdenmukaisia epiteeli-mesenkymaalisia siirtymiä muistuttavien ominaisuuksien kanssa.

ETK-1:tä on käytetty myös mallina kolangiokarsinooman solujen plastisuuden ja solulinjan erilaistumisen tutkimiseen. Hoito DNA-metyylitransferaasi-inhibiittorilla 5-atsasytidiinillä indusoi morfologisia ja fenotyyppisiä muutoksia, mikä johti johdannaisisolulinjaan, jolla oli hepatosyyttimäisiä piirteitä, mukaan lukien AFP:n, albumiinin, integriini α1:n ja trombopoietiinin ilmentyminen sekä tiettyjen sappimarkkerien menetys. Ksenotransplantaattimalleissa hoitamattomat ETK-1-solut muodostavat kasvaimia, jotka vastaavat tubulaarista adenokarsinoomaa ja joilla on duktaalinen fenotyyppi. Nämä havainnot osoittavat, että ETK-1 säilyttää erilaistumiskyvyn ja toimii arvokkaana in vitro -järjestelmänä tutkittaessa sappiteiden epiteelisolujen transdifferenssia hepatosyyteiksi, epigeneettistä säätelyä ja kasvaimen heterogeenisyyttä intrahepaattisessa kolangiokarsinoomassa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa