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4T1
Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Neoplasia maligna
Sinonimi
4T1-A, 4T1.0, 4T1/WT

Documenti

4T1

Cell line · Codice prodotto 300300

The 4T1 murine mammary carcinoma cell line is a widely used model in cancer research due to its high similarity to human breast cancer. Derived from a BAL...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare di carcinoma mammario murino 4T1 è un modello ampiamente utilizzato nella ricerca sul cancro per la sua elevata somiglianza con il cancro al seno umano. Derivata da un topo BALB/c, la crescita tumorale e la diffusione metastatica della linea cellulare 4T1 imitano da vicino il comportamento del carcinoma mammario in fase avanzata nell'uomo. La linea cellulare 4T1 è uno strumento prezioso per studiare la progressione e le metastasi del tumore mammario, comprese le metastasi ossee e le metastasi del cancro al seno. Quando vengono iniettate in topi BALB/c, le cellule 4T1 producono spontaneamente tumori altamente metastatici che possono diffondersi a vari organi come polmoni, fegato, linfonodi e ossa, mentre il tumore primario continua a crescere in situ. Questo modello singeneico 4T1 è particolarmente utile per gli studi sulle metastasi ossee e sul fenotipo metastatico.

L'utilità della cellula 4T1 si estende a tecniche come l'imaging a bioluminescenza, le analisi istologiche e l'uso di marcatori molecolari per tracciare la diffusione e l'impatto della malattia metastatica. Questo approccio consente di esaminare le metastasi spontanee da tumori primari a organi distanti, con l'ausilio di tecniche come la citometria a flusso per analizzare le cellule tumorali e le espressioni dei loro recettori. Il modello immaginabile 4T1 ha permesso di tracciare la crescita tumorale e le metastasi in vivo in modelli animali, facilitando gli studi sulle cellule metastatiche negli organi bersaglio e nei focolai tumorali.

La natura immunocompetente della linea cellulare del tumore mammario del topo 4T1 consente di studiare il ruolo del sistema immunitario e dell'immunità nelle metastasi, nonché l'immunoterapia del cancro. Inoltre, il modello tumorale singeneico 4T1 è stato fondamentale per la caratterizzazione omica e l'individuazione dei geni di fusione.

Nel complesso, la linea cellulare di carcinoma mammario 4T1 è uno strumento versatile per lo studio della biologia del tumore mammario, della metastasi tumorale e dello sviluppo di nuovi trattamenti in contesti sia murini che umani.

Tessuto
Seno, ghiandola mammaria
Malattia
Neoplasia maligna
Applicazioni
le cellule 4T1 imitano accuratamente le caratteristiche del cancro al seno umano nel suo stadio più avanzato, il IV.
Sinonimi
  • 4T1-A
  • 4T1.0
  • 4T1/WT

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì, in topi BALB/c.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
4T1 (numero di catalogo Cytion 300300)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0125

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
BALB/cfC3H