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4T1
Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Neoplasia maligna
Sinónimos
4T1-A, 4T1.0, 4T1/WT

Documentos

4T1

Cell line · Número do produto 300300

The 4T1 murine mammary carcinoma cell line is a widely used model in cancer research due to its high similarity to human breast cancer. Derived from a BAL...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular de carcinoma mamário murino 4T1 é um modelo amplamente utilizado na investigação do cancro devido à sua elevada semelhança com o cancro da mama humano. Derivada de um rato BALB/c, o crescimento do tumor e a disseminação metastática da linha celular 4T1 imitam de perto o comportamento do cancro da mama em fase tardia nos seres humanos. A linha celular 4T1 é uma ferramenta valiosa para estudar a progressão e a metástase do cancro da mama, incluindo metástases ósseas e metástases do cancro da mama. Quando injectadas em ratinhos BALB/c, as células 4T1 produzem espontaneamente tumores altamente metastáticos que podem espalhar-se por vários órgãos, como o pulmão, o fígado, os gânglios linfáticos e o osso, enquanto o tumor primário continua a crescer in situ. Este modelo singénico 4T1 é particularmente útil para estudos de metástases ósseas e do fenótipo metastático.

A utilidade da célula 4T1 estende-se a técnicas como a imagiologia por bioluminescência, as análises histológicas e a utilização de marcadores moleculares para seguir a propagação e o impacto da doença metastática. Esta abordagem permite o exame de metástases espontâneas de tumores primários para órgãos distantes, com o auxílio de técnicas como a citometria de fluxo para analisar as células tumorais e as suas expressões de receptores. O modelo 4T1 imagiável permitiu que a imagiologia biofotónica acompanhasse o crescimento tumoral e as metástases in vivo em modelos animais, facilitando os estudos sobre as células metastáticas em órgãos-alvo e focos tumorais.

A natureza imunocompetente da linha celular de tumor da mama 4T1 do rato permite investigações sobre o papel do sistema imunitário e da imunidade nas metástases, bem como a imunoterapia do cancro. Além disso, o modelo tumoral singénico 4T1 tem sido fundamental na caraterização ómica e na deteção de genes de fusão.

Globalmente, a linha celular 4T1 do carcinoma mamário constitui uma ferramenta versátil para o estudo da biologia do tumor mamário, das metástases tumorais e do desenvolvimento de novos tratamentos, tanto no contexto murino como humano.

Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Neoplasia maligna
Aplicações
as células 4T1 imitam com precisão as caraterísticas do cancro da mama humano na sua fase mais avançada - a fase IV.
Sinónimos
  • 4T1-A
  • 4T1.0
  • 4T1/WT

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos BALB/c.

04Identificadores

Referência
4T1 (número de catálogo Cytion 300300)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0125

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
BALB/cfC3H