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F81
Tessuto
Rene
Sinonimi
F-81, FK81

Documenti

F81

Cell line · Codice prodotto 305015

Le cellule F81 sono una linea cellulare felina, derivata specificatamente dal tessuto renale felino. Queste cellule vengono utilizzate principalmente nella ricerca relativa allo studio dei felini...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule F81 sono una linea cellulare felina, specificamente derivata dal tessuto renale felino. Queste cellule sono utilizzate principalmente nella ricerca relativa allo studio dei virus felini, tra cui il calicivirus felino (FCV), un importante agente patogeno che colpisce i gatti in tutto il mondo. La linea cellulare F81 è nota per la sua suscettibilità a vari ceppi di FCV, che la rende uno strumento indispensabile nella ricerca virologica per lo sviluppo di vaccini e strategie terapeutiche volte a controllare le infezioni virali nei felini.

Oltre che per lo studio del FCV, le cellule F81 sono utilizzate anche nella ricerca su altri patogeni virali che colpiscono i gatti, come l'herpesvirus felino e il virus dell'immunodeficienza felina. La loro robustezza e facilità di coltura rendono le cellule F81 un modello prezioso per gli studi di biologia cellulare e molecolare, facilitando i progressi nella comprensione dei meccanismi cellulari della replicazione virale e delle interazioni ospite-patogeno. Queste cellule contribuiscono in modo significativo alla ricerca traslazionale, portando potenzialmente al miglioramento dei metodi diagnostici e dei trattamenti per le malattie feline.

Tessuto
Rene
Sinonimi
  • F-81
  • FK81

02Classificazione

Organismo
Gatto
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Endoteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
F81 (numero di catalogo Cytion 305015)
Codice fiscale NCBI
9685
Cellosaurus
CVCL_9259

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
3 mesi