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FRhK-4
Tessuto
Rene embrionale
Sinonimi
FRHK-4, Frhk-4, FRhK4, Fetal Rhesus Kidney-4

Documenti

FRhK-4

Cell line · Codice prodotto 305151

The FRhK-4 cell line consists of fibroblast-like cells derived from the kidney of a fetal rhesus monkey (Macaca mulatta). This cell line is widely used in...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare FRhK-4 è costituita da cellule simili a fibroblasti derivate dal rene di una scimmia rhesus fetale (Macaca mulatta). Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica per la sua rilevanza nella biologia dei primati e per la sua utilità nello studio delle infezioni virali, della nefrotossicità e della fisiologia renale. Le cellule presentano la tipica morfologia dei fibroblasti, caratterizzata da una forma allungata e da un'architettura ramificata, che facilita numerosi tipi di esperimenti di biologia cellulare e molecolare.

Le cellule FRhK-4 sono particolarmente note per la loro suscettibilità a vari virus, tra cui il virus 40 della simulazione (SV40) e il polyomavirus. Ciò le rende un modello eccellente per studiare i meccanismi virali di infezione, replicazione e oncogenesi in un sistema di primati. Inoltre, la loro origine dal tessuto renale consente ai ricercatori di esplorare le risposte cellulari alle tossine e ai farmaci renali, rendendoli uno strumento prezioso per gli studi farmacologici e la valutazione della tossicità.

Inoltre, le somiglianze genetiche e fisiologiche delle cellule FRhK-4 con le cellule umane ne supportano l'uso nella ricerca traslazionale, dove i risultati possono avere implicazioni dirette per la comprensione delle malattie renali umane e lo sviluppo di strategie terapeutiche. L'uso di questa linea cellulare in diversi contesti di ricerca sottolinea la sua versatilità e importanza negli studi scientifici che richiedono un modello di primate non umano.

Tessuto
Rene embrionale
Sinonimi
  • FRHK-4
  • Frhk-4
  • FRhK4
  • Fetal Rhesus Kidney-4

02Classificazione

Organismo
Macaco rhesus
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
FRhK-4 (numero di catalogo Cytion 305151)
Codice fiscale NCBI
9544
Cellosaurus
CVCL_4522

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Enzima TrypLE™ Express
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Feto