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Y3-Ag 1.2.3
Tessuto
Plaemocitoma, mieloma
Malattia
Mieloma plasmacellulare di ratto
Sinonimi
Y3.AG.1.2.3, Y3-Ag1.2.3, Y3-Ag1, 2, 3, Y3Ag1.2.3, Y-3-Ag 1.2.3, 210-RC Y3-Ag 1, 2, 3, 210RCY3-Ag1.2.3, 210RCY3-Ag123, Y3-Ag123, Y3, Y3M

Documenti

Y3-Ag 1.2.3

Cell line · Codice prodotto 305207

This cell line is derived from an azaguanine-resistant mutant of S210 myeloma. The cells are resistant to 8-azaguanine but sensitive to HAT. The cells can be...

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01Informazioni generali

Descrizione
Questa linea cellulare deriva da un mutante del mieloma S210 resistente all'azaguanina. Le cellule sono resistenti all'8-azaguanina ma sensibili all'HAT. Le cellule possono essere utilizzate come partner di fusione di cellule B di ratto per la preparazione di ibridomi ratto-ratto. L'uso commerciale o la distribuzione a terzi devono essere autorizzati da C. Milstein.
Tessuto
Plaemocitoma, mieloma
Malattia
Mieloma plasmacellulare di ratto
Sinonimi
  • Y3.AG.1.2.3
  • Y3-Ag1.2.3
  • Y3-Ag1
  • 2
  • 3
  • Y3Ag1.2.3
  • Y-3-Ag 1.2.3
  • 210-RC Y3-Ag 1
  • 2
  • 3
  • 210RCY3-Ag1.2.3
  • 210RCY3-Ag123
  • Y3-Ag123
  • Y3
  • Y3M

02Classificazione

Organismo
Ratto
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Y3-Ag 1.2.3 (numero di catalogo Cytion 305207)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4342

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Immunoglobuline

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
LOU/C