Pereiti prie turinio
Detroit-562
Audinys
Ryklė
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
DETROIT 562, Detroit 562, Detroit562, DETROIT562, Det 562, Det. 562, Det562, D562

Dokumentai

Detroit-562

Cell line · Prekės numeris 300399

Detroit-562 is a human cell line derived from the metastatic site of a pharyngeal carcinoma in an adult male. Established to serve as a model for squamous...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Detroit-562 yra žmogaus ląstelių linija, gauta iš suaugusio vyro ryklės karcinomos metastazių vietos. Šios ląstelės buvo sukurtos kaip plokščialąstelinės karcinomos modelis, todėl yra ypač vertingos tiriant biologinius ir molekulinius mechanizmus, susijusius su naviko progresavimu ir metastazėmis. Detroit-562 ląstelės pasižymi epitelio morfologija ir gali formuoti plokščialąstelines karcinomas, kai yra persodinamos į imunokompromituotas peles, todėl jos yra patikimas in vivo vėžio tyrimų modelis.

Ši ląstelių linija buvo plačiai naudojama tiriant ląstelių signalizacijos kelius, kurie yra svarbūs vėžio vystymuisi, pavyzdžiui, susijusius su epidermio augimo faktoriaus receptoriumi (EGFR). Mokslininkai taip pat naudojo Detroit-562 ląsteles galimiems terapijos metodams tirti, įskaitant vaistų atranką ir radioterapijos veiksmingumą. Dėl jų jautrumo įvairiems chemoterapiniams preparatams jos tampa svarbia priemone farmakologiškai vertinant naujus priešvėžinius junginius.

Audinys
Ryklė
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
  • DETROIT 562
  • Detroit 562
  • Detroit562
  • DETROIT562
  • Det 562
  • Det. 562
  • Det562
  • D562

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
Detroit-562 (Cytion katalogo numeris 300399)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1171

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Izofermentai
G6PD, B
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Keratinas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių