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Detroit-562
Gewebe
Pharynx
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
DETROIT 562, Detroit 562, Detroit562, DETROIT562, Det 562, Det. 562, Det562, D562

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Detroit-562

Cell line · Artikelnummer 300399

Detroit-562 is a human cell line derived from the metastatic site of a pharyngeal carcinoma in an adult male. Established to serve as a model for squamous...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Detroit-562 ist eine humane Zelllinie, die aus der metastatischen Stelle eines Pharynxkarzinoms bei einem erwachsenen Mann stammt. Diese Zellen wurden als Modell für Plattenepithelkarzinome entwickelt und sind besonders wertvoll für die Untersuchung der biologischen und molekularen Mechanismen, die an der Tumorprogression und Metastasierung beteiligt sind. Die Detroit-562-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und sind in der Lage, Plattenepithelkarzinome zu bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse transplantiert werden, was sie zu einem robusten In-vivo-Modell für die Krebsforschung macht.

Diese Zelllinie wurde ausgiebig für die Untersuchung von Zellsignalwegen genutzt, die bei der Krebsentstehung von zentraler Bedeutung sind, wie z. B. die des epidermalen Wachstumsfaktorrezeptors (EGFR). Forscher haben Detroit-562-Zellen auch für die Untersuchung potenzieller therapeutischer Ansätze genutzt, darunter das Screening von Medikamenten und die Wirksamkeit von Strahlentherapien. Da sie auf verschiedene Chemotherapeutika ansprechen, sind sie ein wichtiges Instrument für die pharmakologische Bewertung neuer Krebsmedikamente.

Gewebe
Pharynx
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • DETROIT 562
  • Detroit 562
  • Detroit562
  • DETROIT562
  • Det 562
  • Det. 562
  • Det562
  • D562

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
Detroit-562 (Cytion-Katalognummer 300399)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1171

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 positiv
Isoenzyme
G6PD, B
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
Keratin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 4 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch