Přejít na obsah
Detroit-562
Tkáň
Hltan
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
DETROIT 562, Detroit 562, Detroit562, DETROIT562, Det 562, Det. 562, Det562, D562

Dokumenty

Detroit-562

Cell line · Číslo výrobku 300399

Detroit-562 is a human cell line derived from the metastatic site of a pharyngeal carcinoma in an adult male. Established to serve as a model for squamous...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Detroit-562 je lidská buněčná linie odvozená z metastatického ložiska karcinomu hltanu u dospělého muže. Tyto buňky byly vytvořeny jako model dlaždicobuněčného karcinomu a jsou zvláště cenné pro studium biologických a molekulárních mechanismů, které se podílejí na progresi nádoru a metastazování. Buňky Detroit-562 vykazují epiteliální morfologii a jsou schopny vytvářet dlaždicobuněčné karcinomy při transplantaci do imunokompromitovaných myší, což z nich činí robustní in vivo model pro výzkum rakoviny.

Tato buněčná linie byla hojně využívána při zkoumání buněčných signálních drah, které jsou klíčové pro vývoj rakoviny, například drah zahrnujících receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR). Vědci také využili buňky Detroit-562 ke zkoumání potenciálních terapeutických přístupů, včetně screeningu léčiv a účinnosti radioterapie. Jejich reaktivita na různé chemoterapeutické látky z nich činí důležitý nástroj pro farmakologické hodnocení nových protinádorových sloučenin.

Tkáň
Hltan
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • DETROIT 562
  • Detroit 562
  • Detroit562
  • DETROIT562
  • Det 562
  • Det. 562
  • Det562
  • D562

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
Detroit-562 (katalogové číslo Cytion 300399)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1171

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 pozitivní
Isoenzymy
G6PD, B
Reverzní transkriptáza
Negativní
Produkty
Keratin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní vrstvu za přibližně 4 dny.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dospělí
Etnická příslušnost
Kavkazský