Przejdź do treści
Detroit-562
Chusteczka
Gardło
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
DETROIT 562, Detroit 562, Detroit562, DETROIT562, Det 562, Det. 562, Det562, D562

Dokumenty

Detroit-562

Cell line · Numer produktu 300399

Detroit-562 is a human cell line derived from the metastatic site of a pharyngeal carcinoma in an adult male. Established to serve as a model for squamous...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Detroit-562 to ludzka linia komórkowa pochodząca z miejsca przerzutu raka gardła u dorosłego mężczyzny. Komórki te, stworzone jako model raka płaskonabłonkowego, są szczególnie cenne do badania biologicznych i molekularnych mechanizmów związanych z progresją nowotworu i przerzutami. Komórki Detroit-562 wykazują morfologię nabłonkową i są zdolne do tworzenia raka płaskonabłonkowego po przeszczepieniu do myszy z obniżoną odpornością, co czyni je solidnym modelem in vivo do badań nad rakiem.

Ta linia komórkowa była szeroko wykorzystywana do badania szlaków sygnalizacji komórkowej, które są kluczowe w rozwoju raka, takich jak te obejmujące receptor naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Naukowcy wykorzystali również komórki Detroit-562 do badania potencjalnych podejść terapeutycznych, w tym badań przesiewowych leków i skuteczności radioterapii. Ich wrażliwość na różne środki chemioterapeutyczne sprawia, że są one krytycznym narzędziem w ocenie farmakologicznej nowych związków przeciwnowotworowych.

Chusteczka
Gardło
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • DETROIT 562
  • Detroit 562
  • Detroit562
  • DETROIT562
  • Det 562
  • Det. 562
  • Det562
  • D562

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
Detroit-562 (numer katalogowy Cytion 300399)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1171

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
P53 dodatni
Izoenzymy
G6PD, B
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Keratyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 utworzy zlewającą się warstwę w ciągu około 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły
Pochodzenie etniczne
Kaukaski