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Detroit-562
Tecido
Faringe
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
DETROIT 562, Detroit 562, Detroit562, DETROIT562, Det 562, Det. 562, Det562, D562

Documentos

Detroit-562

Cell line · Número do produto 300399

Detroit-562 is a human cell line derived from the metastatic site of a pharyngeal carcinoma in an adult male. Established to serve as a model for squamous...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
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1

01Informações gerais

Descrição

A Detroit-562 é uma linha celular humana derivada do local metastático de um carcinoma da faringe de um homem adulto. Estabelecidas para servir de modelo para o carcinoma de células escamosas, estas células são particularmente valiosas para o estudo dos mecanismos biológicos e moleculares envolvidos na progressão e metástase do tumor. As células Detroit-562 apresentam uma morfologia epitelial e são capazes de formar carcinomas de células escamosas quando transplantadas para ratinhos imunocomprometidos, o que as torna um modelo in vivo robusto para a investigação do cancro.

Esta linha celular tem sido amplamente utilizada na análise das vias de sinalização celular que são fundamentais no desenvolvimento do cancro, tais como as que envolvem o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). Os investigadores também utilizaram as células Detroit-562 para investigar potenciais abordagens terapêuticas, incluindo o rastreio de medicamentos e a eficácia da radioterapia. A sua capacidade de resposta a vários agentes quimioterapêuticos torna-as uma ferramenta essencial na avaliação farmacológica de novos compostos anticancerígenos.

Tecido
Faringe
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • DETROIT 562
  • Detroit 562
  • Detroit562
  • DETROIT562
  • Det 562
  • Det. 562
  • Det562
  • D562

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
Detroit-562 (número de catálogo Cytion 300399)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1171

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
P53 positivo
Isoenzimas
G6PD, B
Transcriptase reversa
Negativo
Produtos
Queratina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² produzirá uma camada confluente em cerca de 4 dias
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto
Etnia
Caucasiano