Pāriet uz saturu
EB1
Audums
Asinis
Slimība
Burkita limfoma
Sinonīmi
EB-1, Epstein-Barr-1

Dokumenti

EB1

Cell line · Preces numurs 300403

The EB1 cell line is a human-derived cell line established from biopsy fragments and cell clumps of Burkitt lymphoma. This line was originally cultivated ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

EB1 šūnu līnija ir no cilvēka iegūta šūnu līnija, kas izveidota no Burkita limfomas biopsijas fragmentiem un šūnapvalkiem. Sākotnēji šī līnija tika kultivēta Eagle bāzes barotnē, kas papildināta ar 10 % cilvēka seruma. Unikālie augšanas apstākļi veicināja šūnu attīstību, kas pārsvarā auga kā brīvi peldošas atsevišķas vienības vai dubultas vienības. EB1 šūnām ir raksturīgs aptuveni 48 stundu dubultošanās laiks, kas norāda uz to straujo proliferāciju, kas ir raksturīga limfoblastu iezīme.

Morfoloģiski EB1 šūnas uzrāda vienveidīgi izmainītas limfoblastu īpašības, kas norāda uz to izcelsmi no limfoīdiem audiem. Šī šūnu līnija ir plaši izmantota Burkita limfomas pētījumos, sniedzot ieskatu limfoīdo ļaundabīgo audzēju patoloģijā. Tā kalpo kā vērtīgs modelis limfoīdo šūnu bioloģiskās uzvedības izpētei dažādos eksperimentālos apstākļos, palīdzot izpētīt terapeitiskos mērķus un izprast limfomas progresēšanu.

Audums
Asinis
Slimība
Burkita limfoma
Sinonīmi
  • EB-1
  • Epstein-Barr-1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Polimorfas šūnas, lieli kodoli, mikroviļu veidošanās
Šūnu tips
B limfocīts
Kariotips
Hromosomu biežuma sadalījums 30 šūnas: 2n = 46. Šūnu līnija ir aneuploīdas sievietes, ar hromosomu skaitu tuvu dipoidā. Normālas hromosomas N8, N11 un N14 ir monosomiskas, pārējās autosomas parasti ir pārainas. X hromosoma visbiežāk ir trisomiska. Ir četras marķieru hromosomas. Divas no tām (marķieri M1 un M3) ietver abpusēju translokāciju starp hromosomām N8 un N14, kas saistīta ar lielāko daļu Burkita limfomas šūnu līniju.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
EB1 (Cytion kataloga numurs 300403)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2027

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
PGM1, ESD1, GLO-1, G6PD, B
Vīrusi
Satur herpesvīrusu

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Šūnas jākultivē, pārnesot daļu suspensijas uz jaunām šūnu kultūru kolbām, kas iepriekš piepildītas ar svaigu barotni. Alternatīvi kopas var savākt, centrifugējot, un atkārtoti suspendēt svaigā barotnē.
Sēšanas blīvums
0,1 x 106 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām vismaz 24 stundas atgūties no sasaldēšanas procesa
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
9 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas