Pāriet uz saturu
HCC1937
Audums
Krūts dziedzeris, krūts, kanāls
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Sinonīmi
HCC-1937, HCC/1937

Dokumenti

HCC1937

Cell line · Preces numurs 305064

HCC1937 is a human breast carcinoma cell line derived from a primary tumor of an adult female. This cell line exhibits several genetic alterations charact...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC1937 ir cilvēka krūts karcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušas sievietes primārā audzēja. Šai šūnu līnijai ir vairākas ģenētiskas izmaiņas, kas raksturīgas agresīvam krūts vēža fenotipam, tostarp homozigotiska BRCA1 gēna mutācija (5382C mutācija), kas ir ievērojams predispozīcijas uz krūts vēzi marķieris. Šīs mutācijas klātbūtne atbilst ģimeniskam krūts vēža modelim, jo tā ir konstatēta arī citiem ģimenes locekļiem, norādot uz ļaundabīgā audzēja iedzimtību. Turklāt HCC1937 ir iegūta TP53 gēna mutācija, kas saistīta ar savvaļas tipa alēles zudumu, kas vēl vairāk pastiprina tās audzēja supresora trūkumus.

Šai šūnu līnijai ir arī homozigotiska PTEN gēna delēcija un heterozigotiskuma zudums vairākos lokusos, kas saistīti ar vēža patoģenēzi, kas liecina par sarežģītu ģenētisko fonu, kas veicina onkogēnu transformāciju. No fenotipiskā viedokļa HCC1937 neekspresē estrogēnu receptoru (ER) vai progesterona receptoru (PR), kas to klasificē kā ER-negatīvu un PR-negatīvu, kas ir raksturīgi agresīvākas slimības norises marķieri. Turklāt šūnas neizsaka Her2-neu un p53, bet pozitīvi uzrāda epitēlija glikoproteīnu 2 (EGP2) un citokeratīnu 19, kas liecina par to epitēlija izcelsmi un ļaundabīgo raksturu. HCC1937 specifiskais marķieru profils un ģenētiskā struktūra padara HCC1937 par vērtīgu modeli krūts vēža molekulāro mehānismu izpētei un mērķterapijas testēšanai līdzīga agresīva krūts vēža profila gadījumā.

Audums
Krūts dziedzeris, krūts, kanāls
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Sinonīmi
  • HCC-1937
  • HCC/1937

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HCC1937 (Cytion kataloga numurs 305064)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0290

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Estrogēnu receptoru, negatīvs, progesterona receptoru, negatīvs
Proteīnu ekspresija
Epitēlija glikoproteīns 2(Egp2), citokeratīns 19

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
23 gadi
Etniskā piederība
Eiropas