Pāriet uz saturu
Hepa 1-6
Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
HEPA 1-6, Hepa-1-6, Hepa1-6

Dokumenti

Hepa 1-6

Cell line · Preces numurs 400474

The Hepa 1-6 cell line is a well-characterized model derived from a hepatoma induced in an adult mouse. This cell line is commonly used in biomedical rese...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Hepa 1-6 šūnu līnija ir labi raksturots modelis, kas iegūts no hepatomas, kura radīta pieaugušai pelei. Šo šūnu līniju parasti izmanto biomedicīniskajos pētījumos, koncentrējoties uz aknu vēža, aknu metabolisma un toksikoloģijas izpēti. Šūnām ir epitēlija morfoloģija, un tām piemīt nediferencētas hepatocelulārās karcinomas fenotips. Hepa 1-6 ir īpaši vērtīga, lai pētītu bioķīmiskos ceļus, kas saistīti ar aknu darbību, un šūnu mehānismus, kas ir hepatokarcinogēzes pamatā.

Hepa 1-6 šūnas ir pazīstamas ar to, ka tās ir viegli kultivējamas un saglabā stabilu augšanu un vairošanos standarta laboratorijas apstākļos. Tās ekspresē vairākus citohroma P450 enzīmus, padarot tās par lielisku līdzekli farmakoloģiskiem un toksikoloģiskiem pētījumiem. Šīs šūnas izmanto arī, lai pētītu gēnu ekspresijas regulāciju aknu šūnās un izprastu dažādu vielu ietekmi uz aknu darbību. Tā kā Hepa 1-6 šūnas ir izturīgas un saistītas ar cilvēka aknu slimībām, tās joprojām ir svarīgs resurss aknu slimību pētniecībā.

Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • HEPA 1-6
  • Hepa-1-6
  • Hepa1-6

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, C57BL/6 pelēm.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
25 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Hepa 1-6 (Cytion kataloga numurs 400474)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0327

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Ektromēlijas vīruss (peļu bakas): Negatīvs.
Produkti
Albumīns, alfa fetoproteīns (AFP, alfa-fetoproteīns), albumīns, alfa antitripsīns (alfa-1-antitripsīns), amilāze

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Labi. Ļaujiet šūnām 24-48 stundas atgūties pēc sasaldēšanas procesa.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57/L