Pāriet uz saturu
SK-CO-1
Audums
Lielais zarnu trakts, resnā zarna
Slimība
Kolorektālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
ascīts
Sinonīmi
SKCO-1, SKCO 1, SKCO1, SKCol1, SK-Col-1, SK Col 1

Dokumenti

SK-CO-1

Cell line · Preces numurs 305626

The SK-CO-1 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a metastatic site in ascitic fluid. It has been widely used in cancer resear...

€540.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-CO-1 šūnu līnija ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas modelis, kas iegūts no metastāzes vietas ascīta šķidrumā. To plaši izmanto vēža pētījumos, lai izpētītu molekulāros mehānismus, kas ir kolorektālā vēža (CRC) progresēšanas un reakcijas uz terapeitiskām iejaukšanām pamatā. SK-CO-1 šūnas kultūrā ir adhezīvas un uzrāda morfoloģiskas īpašības, kas atbilst epitēlija audzēja šūnām. Šī šūnu līnija ir iekļauta liela mēroga genomikas pētījumos, piemēram, Vēža šūnu līniju enciklopēdijā (CCLE), kas sniedz visaptverošu ģenētisko, transkriptomisko un farmakoloģisko profilēšanu.

Ģenētiskajos pētījumos par SK-CO-1 ir identificētas mutācijas un gēnu kopiju skaita variācijas, kas ir kritiskas CRC patogēnēzei, tostarp izmaiņas TP53, KRAS un APC gēnos. Šīs īpašības padara to par vērtīgu modeli tādu signālceļu izpētei kā WNT/β-katenīna signālceļš, kam ir nozīmīga loma kolorektālo audzēju attīstībā. Turklāt farmakoloģiskā skrīninga rezultāti ir atklājuši šīs šūnu līnijas atšķirīgo jutību pret ķīmijterapijas līdzekļiem, palīdzot pētniekiem identificēt potenciālos biomarkerus zāļu iedarbībai.

Audums
Lielais zarnu trakts, resnā zarna
Slimība
Kolorektālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
ascīts
Pieteikumi
3D šūnu kultūras
Sinonīmi
  • SKCO-1
  • SKCO 1
  • SKCO1
  • SKCol1
  • SK-Col-1
  • SK Col 1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Kariotips
(P7) no hipertriploīda līdz hipotetraploīdam ar anomālijām, tostarp dicentrikām, minūtēm, gredzeniem, sekundāriem sašaurinājumiem un 8 lieliem submetacentriskiem marķieriem
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
46 stundas

04Identifikatori

Atsauce
SK-CO-1 (Cytion kataloga numurs 305626)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0626

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Asins grupa O; Rh+; HLA A1, A3, B7, B13
Izoenzīmi
AK-1, 1–2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1–2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1–2
Onkogēni
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl-, ros-, src-
Mutāciju profils
Mutācija: APC, vienkārša, p.Phe1089fs*37 (c.3266delT), heterozigota; Mutācija: APC, vienkārša, p.Pro1443fs*30 (c.4328delC), heterozigota; Mutācija: GNAS, vienkārša, p.Arg201Cys (c.601C>T), heterozigota; Mutācija: KRAS, vienkārša, p.Gly12Val (c.35G>T), heterozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Nolejiet barotni un noskalojiet ar 0,25 % tripsīna un 0,03 % EDTA šķīdumu. Nolejiet šķīdumu un pievienojiet vēl 1–2 ml tripsīna-EDTA šķīduma. Ļaujiet kolbai pastāvēt istabas temperatūrā (vai 37 °C), līdz šūnas atdalās. Pievienojiet svaigu barotni, nosūciet un pārlejiet jaunās kultivēšanas kolbās.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
65 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis