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SK-CO-1
Tessuto
Intestino crasso, colon
Malattia
Adenocarcinoma colorettale
Sito metastatico
ascite
Sinonimi
SKCO-1, SKCO 1, SKCO1, SKCol1, SK-Col-1, SK Col 1

Documenti

SK-CO-1

Cell line · Codice prodotto 305626

The SK-CO-1 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a metastatic site in ascitic fluid. It has been widely used in cancer resear...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SK-CO-1 è un modello di adenocarcinoma colorettale umano derivato da un sito metastatico nel liquido ascitico. È stata ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del cancro colorettale (CRC) e della risposta agli interventi terapeutici. Le cellule SK-CO-1 sono aderenti in coltura e presentano caratteristiche morfologiche compatibili con le cellule tumorali epiteliali. Questa linea cellulare è stata inclusa in studi genomici su larga scala, come la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), che fornisce un profilo genetico, trascrittomico e farmacologico completo.

Gli studi genetici su SK-CO-1 hanno identificato mutazioni e variazioni del numero di copie in geni critici per la patogenesi del CRC, comprese alterazioni in TP53, KRAS e APC. Queste caratteristiche la rendono un modello prezioso per esplorare vie come la segnalazione WNT/β-catenina, che svolge un ruolo significativo nello sviluppo del tumore colorettale. Inoltre, lo screening farmacologico ha rivelato le sensibilità differenziali della linea cellulare agli agenti chemioterapici, aiutando i ricercatori a identificare potenziali biomarcatori per la risposta ai farmaci.

Tessuto
Intestino crasso, colon
Malattia
Adenocarcinoma colorettale
Sito metastatico
ascite
Applicazioni
coltura cellulare 3D
Sinonimi
  • SKCO-1
  • SKCO 1
  • SKCO1
  • SKCol1
  • SK-Col-1
  • SK Col 1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Cariotipo
(P7) da ipertriploide a ipotetraploide con anomalie quali dicentrici, cromosomi minuscoli, cromosomi ad anello, costrizioni secondarie e 8 marcatori submetacentrici di grandi dimensioni
Tempo di raddoppio
46 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-CO-1 (codice catalogo Cytion 305626)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0626

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno O; Rh+; HLA A1, A3, B7, B13
Isoenzimi
AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1-2
Oncogeni
Myc+, ras+, myb+, fos+, sis+, p53+, abl-, ros-, src-
Profilo mutazionale
Mutazione: APC, semplice, p.Phe1089fs*37 (c.3266delT), eterozigote; Mutazione: APC, semplice, p.Pro1443fs*30 (c.4328delC), eterozigote; Mutazione: GNAS, semplice, p.Arg201Cys (c.601C>T), eterozigote; Mutazione: KRAS, semplice, p.Gly12Val (c.35G>T), eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il terreno di coltura e risciacquare con una soluzione di tripsina allo 0,25% e EDTA allo 0,03%. Rimuovere la soluzione e aggiungere altri 1-2 ml di soluzione di tripsina-EDTA. Lasciare riposare il pallone a temperatura ambiente (o a 37 °C) fino a quando le cellule non si staccano. Aggiungere terreno di coltura fresco, aspirare il contenuto e trasferirlo in nuovi palloni di coltura.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
65 anni
Etnia
Caucasico