Gå til innholdet
HEK293-GPRC5D
Vev
Fosterets nyre
Sykdom
Transformert/immortaliseret; ikke-tumorogen (HEK293-bakgrunn)

Dokumenter

HEK293-GPRC5D

Cell line · Produktnummer 305989

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder som driver ideell virksomhet. For kommersielle aktører gjelder prisene...

€1,900.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og ideelle organisasjoner. For kommersielle aktører er prisen ca. 6 250 euro.
Hvis du representerer en kommersiell aktør eller er usikker på hvilken kategori som gjelder, vennligst kontakt oss.


HEK293-GPRC5D-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293) som er genmodifisert for å uttrykke humant G-proteinkoblet reseptor, familie C, gruppe 5, medlem D (GPRC5D) på en stabil måte, en såkalt «orphan»-reseptor som tilhører klasse C av G-proteinkoblede reseptorer. GPRC5D viser svært begrenset uttrykk i normalt vev, med overveiende uttrykk rapportert i hårsekker, keratiniserte vev og plasmaceller. Det er viktig å merke seg at reseptoren uttrykkes i høy grad ved multippelt myelom og visse andre plasmacellemaligniteter, hvor dens begrensede distribusjon i normalt vev og robuste tumorassosierte uttrykk har gjort den til et fremtredende mål for utvikling av immunterapi, særlig hos pasienter som får tilbakefall etter BCMA-rettede behandlinger.

HEK293-GPRC5D-celler er mye brukt i hematologisk onkologisk forskning og terapeutisk utvikling for karakterisering av GPRC5D-målrettede monoklonale antistoffer, bispesifikke T-celle-engasjerende midler, antistoff-legemiddelkonjugater og CAR-T- eller CAR-NK-cellebehandlinger. Det stabile rekombinante ekspresjonssystemet muliggjør kvantitativ evaluering av antigenbindingsaffinitet, reseptorbelegg, overflateekspresjonstetthet, epitopspesifisitet og målavhengig cytotoksisitet. Disse cellene er særlig verdifulle for å vurdere aktiviteten og selektiviteten til konstruerte immuncelleterapier og T-celleomdirigerende biologiske legemidler rettet mot GPRC5D-positive maligniteter. Ytterligere anvendelser inkluderer utvikling av flowcytometri-assayer, reporterassayer, høykapasitetsscreening og validering av reseptorspesifikke bildedannende midler eller diagnostiske reagenser.

Vev
Fosterets nyre
Sykdom
Transformert/immortaliseret; ikke-tumorogen (HEK293-bakgrunn)
Søknader
Utvikling av GPRC5D-rettede antistoffer og bispesifikke antistoffer; behandlingsmetoder for multippelt myelom; CAR-T-cellebehandling; ADCC-/CDC-analyser; strømningscytometri; screening innen immunonkologi

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller
Fordoblingstid
ca. 24–36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-GPRC5D (Cytion-katalognummer 305989)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
GPRC5D

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsett Geneticin (G418-Sulfat) for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 1 mg/ml.
Dissosiasjonsmiddel
Trypsin-EDTA
Subkultivering
For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C til cellene løsner (5-10 minutter). Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsett komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspender cellene forsiktig, og overfør en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining

Etter tining deles cellene i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellene får komme seg etter fryseprosessen og feste seg (for adherente kulturer) i minst 24 timer.

Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster