Przejdź do treści
AH-130 FN
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
AH130FN-TC, AH130FN, AH-130F(N), AH-130FN, AH 130 FN

Dokumenty

AH-130 FN

Cell line · Numer produktu 500451

AH-130 FN is a variant of the AH-130 rat ascites tumor cell line, used extensively in studies related to coagulation, fibrinolysis, and metastasis. These ...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

AH-130 FN to wariant linii komórek nowotworowych wodobrzusza szczura AH-130, szeroko wykorzystywany w badaniach związanych z krzepnięciem, fibrynolizą i przerzutami. Komórki te pochodzą od szczurów i są zwykle utrzymywane poprzez seryjną implantację dootrzewnową u samców szczurów Donryu. Sama linia AH-130 jest znana z wysokiej aktywności tromboplastycznej i fibrynolitycznej, które są powiązane z jej rolą w promowaniu przerzutów krwiopochodnych, zwłaszcza w płucach. Natomiast wariant AH-130 FN ma niższą aktywność tromboplastyczną i fibrynolityczną. Ta różnica w aktywności enzymatycznej między AH-130 i AH-130 FN ma kluczowe znaczenie, ponieważ wpływa na tworzenie się skrzeplin i liczbę ognisk przerzutowych w płucach po inokulacji dożylnej.

Badania wykazały, że po wstrzyknięciu dożylnym komórki AH-130 powodują znaczne zmniejszenie liczby płytek krwi i poziomu fibrynogenu, co wskazuje na zwiększone tworzenie się skrzeplin. Efekt ten jest znacznie wyraźniejszy niż w przypadku AH-130 FN. Badania histologiczne wykazują, że AH-130 tworzy bardziej obfite ogniska przerzutowe w płucach w porównaniu z AH-130 FN, zarówno po 72 godzinach, jak i 7 dniach po inokulacji. AH-130 wiąże się z tworzeniem skrzeplin złożonych z płytek krwi i fibryny wokół zatorowanych komórek nowotworowych, podczas gdy AH-130 FN wykazuje rzadkie tworzenie skrzeplin. Odkrycia te sugerują, że wyższa aktywność tromboplastyczna AH-130 odgrywa znaczącą rolę w promowaniu przerzutów poprzez agregację płytek krwi i odkładanie fibryny wokół komórek nowotworowych, co jest procesem mniej widocznym w AH-130 FN.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
  • AH130FN-TC
  • AH130FN
  • AH-130F(N)
  • AH-130FN
  • AH 130 FN

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki w zawiesinie, podobne do nabłonka, gdy przylegają
Nowotworotwórczy
Tak, u szczurów rasy Wistar.

04Identyfikatory

Źródło
AH-130 FN (numer katalogowy Cytion 500451)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5683

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Negatywny wynik testu RAP. .

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Gęstość wysiewu
1 x 106 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.