Przejdź do treści
CFPAC-1
Chusteczka
Trzustka
Choroba
Mukowiscydoza, gruczolakorak przewodowy trzustki
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumenty

CFPAC-1

Cell line · Numer produktu 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki CFPAC-1, pochodzące od 26-letniego mężczyzny z mukowiscydozą i przerzutami do wątroby gruczolakoraka przewodowego, są hiperdiploidalną linią komórkową o godnych uwagi cechach do badań biologicznych. Ich właściwości wzrostu adherencji i zdolność do tworzenia nowotworów u nagich myszy sprawiają, że są one praktycznym modelem do badań nad rakiem in vitro. Kariotyp linii komórkowej obejmuje modalną liczbę 73 chromosomów z kilkoma translokacjami, a co ważne, dwie do trzech kopii chromosomu 7, w którym znajduje się gen mukowiscydozy.

Komórki te wyrażają antygeny i geny związane z rakiem, takie jak CA19-9, antygen rakowo-płodowy (CEA), antygen onkofetalny trzustki (POA), antygen związany z gruczolakorakiem (ACAA) i keratyny nabłonkowe, oferując wgląd w biologię raka. Jeśli chodzi o patologię mukowiscydozy, komórki CFPAC-1 wykazują unikalną aktywność transportu jonów. Nie reagują na agonistów cAMP, stymulatory cyklazy adenylowej lub inhibitory fosfodiesterazy dla przepływu jonów chlorkowych, ale wykazują zwiększony wypływ chlorków w odpowiedzi na jonofory wapnia.

Komórki CFPAC-1 są nosicielami powszechnej mutacji mukowiscydozy - delecji trzech nukleotydów prowadzącej do braku fenyloalaniny w pozycji 508 w genie CFTR. Morfologicznie wykazują cechy nabłonkowe z mikrokosmkami wierzchołkowymi, połączeniami ścisłymi i połączeniami szczelinowymi, istotnymi dla badania interakcji tkanki nabłonkowej zarówno w raku, jak i mukowiscydozie.

Chusteczka
Trzustka
Choroba
Mukowiscydoza, gruczolakorak przewodowy trzustki
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
CFPAC-1 (numer katalogowy Cytion 305066)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Antygen rakowo-płodowy (Cea), 9 Ng/Ml, Antygen onkofetalny trzustki (Poa), 28 Ng/Ml, Antygen związany z gruczolakorakiem (Acaa), 5000 Ng/Ml, Antygen Ca 19-9, 12000 jednostek/Ml, Keratyny nabłonkowe
Ekspresja antygenu
Antygen CA19-9, 12000 jednostek/ml, keratyny nabłonkowe

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
IMDM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 3,024 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820800a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
26 lat
Pochodzenie etniczne
Europejski