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HS-729
Tecido
Osso
Doença
Rabdomiossarcoma embrionário
Sinónimos
Hs 729, Hs 729.T, Hs729, HS729, Hs-729-T, Hs 729T, Hs729T, HS729T

Documentos

HS-729

Cell line · Número do produto 300443

The HS-729 cell line, originating from human bone and associated with embryonal rhabdomyosarcoma, serves as a critical tool in cancer research. This cell ...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HS-729, originária do osso humano e associada ao rabdomiossarcoma embrionário, constitui uma ferramenta fundamental na investigação do cancro. Esta linha celular é derivada de uma forma de cancro altamente maligna e agressiva que afecta principalmente o tecido muscular esquelético, frequentemente em doentes pediátricos. O estudo das células HS-729 permite aos investigadores aprofundar os mecanismos moleculares e as alterações genéticas que determinam o desenvolvimento e a progressão do rabdomiossarcoma embrionário. Estes conhecimentos são valiosos para a identificação de potenciais alvos terapêuticos e para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento.

As células HS-729 apresentam caraterísticas típicas do rabdomiossarcoma, incluindo a expressão de marcadores específicos do músculo e uma propensão para uma rápida proliferação. Constituem um sistema modelo para testar a eficácia dos medicamentos anticancerígenos e compreender os mecanismos de resistência aos medicamentos. Além disso, as células HS-729 são fundamentais para o estudo das interações do microambiente tumoral, do comportamento metastático e do papel de várias vias de sinalização na progressão do cancro. Apesar das limitadas informações específicas disponíveis sobre a HS-729, as linhas celulares desta natureza continuam a ser indispensáveis na batalha em curso contra o cancro, oferecendo esperança de tratamentos mais eficazes e orientados no futuro.

Tecido
Osso
Doença
Rabdomiossarcoma embrionário
Sinónimos
  • Hs 729
  • Hs 729.T
  • Hs729
  • HS729
  • Hs-729-T
  • Hs 729T
  • Hs729T
  • HS729T

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos

04Identificadores

Referência
HS-729 (número de catálogo Cytion 300443)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0871

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
G6PD, B

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
74 anos
Etnia
Caucasiano