A375-GFP

A375-GFP je geneticky modifikovaná varianta ľudskej buneckej línie malígneho melanómu A375, ktorá stabilne exprimuje zvýšene zelený fluorescenčný proteín (eGFP). Pôvodná bunková línia A375 pochádza z kožného melanómu dospelého pacienta a je široko používaná ako model kožného melanómu, najmä pre štúdie týkajúce sa onkogénnej BRAF signalizácie, keďže obsahuje mutáciu BRAF V600E. Táto mutácia vedie k konštitutívnej aktivácii signálnej dráhy MAPK/ERK, čo podporuje proliferáciu a prežívanie buniek, vďaka čomu sú bunky A375 veľmi vhodné na skúmanie cielených terapií, ako sú inhibítory BRAF a MEK. Derivát exprimujúci GFP si zachováva tieto molekulárne a fenotypové charakteristiky a zároveň umožňuje aplikácie založené na fluorescencii.

Stabilná inkorporácia eGFP reportéra umožňuje vizualizáciu buniek A375-GFP v reálnom čase v systémoch in vitro aj in vivo. Fluorescenčné zobrazovanie uľahčuje monitorovanie bunkovej proliferácie, migrácie, invázie a morfologických zmien, ako aj sledovanie rastu nádoru a metastatického šírenia v xenotransplantačných modeloch. Vylepšená varianta GFP poskytuje vyššiu jasnosť a stabilitu v porovnaní s predchádzajúcimi konštruktmi GFP, čo umožňuje citlivú detekciu aj pri nízkom počte buniek. Vďaka tomu je A375-GFP obzvlášť užitočný v experimentoch s kokultúrami, na platformách zobrazovania s vysokým obsahom údajov a v štúdiách vyžadujúcich presné priestorové rozlíšenie správania nádorových buniek.

A375-GFP si zachováva agresívny a proliferatívny fenotyp pôvodnej línie melanómu, vrátane citlivosti na inhibítory MAPK dráhy a schopnosti invázie a metastázovania v experimentálnych modeloch. Pridanie GFP rozširuje jej využiteľnosť pri skríningu liekov, zobrazovaní živých buniek a štúdiách interakcie nádoru s mikroprostredím. Rovnako ako v prípade iných bunkových línií označených reportérom sa pre konkrétne experimentálne aplikácie odporúča overenie stability a konzistencie fluorescencie v priebehu pasáží.

Genetická modifikácia: Stabilne modifikovaná replikačne nekompetentnou lentivírusovou transdukciou na expresiu reportéra zeleného fluorescenčného proteínu ZsGreen1; udržiavaná ako polyklonálna populácia pod selekciou puromycínom (1–5 µg/ml). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke