A375-GFP

A375-GFP เป็นสายพันธุ์เซลล์เมลาโนมาชนิดร้ายของมนุษย์ A375 ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม เพื่อแสดงโปรตีนเรืองแสงสีเขียวแบบเสริม (eGFP) อย่างคงที่ สายเซลล์ A375 ต้นแบบมีต้นกำเนิดจากก้อนมะเร็งเมลาโนมาผิวหนังของผู้ป่วยผู้ใหญ่ และถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองสำหรับมะเร็งเมลาโนมาผิวหนัง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับสัญญาณ BRAF ที่ก่อให้เกิดมะเร็ง เนื่องจากมันมีการกลายพันธุ์ BRAF V600E การกลายพันธุ์นี้นำไปสู่การกระตุ้นอย่างต่อเนื่องของเส้นทาง MAPK/ERK ซึ่งส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์ ทำให้เซลล์ A375 มีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาการรักษาแบบมุ่งเป้า เช่น ยับยั้ง BRAF และ MEK สายพันธุ์ที่แสดง GFP นี้ยังคงรักษาลักษณะทางโมเลกุลและฟีโนไทป์เดิมไว้ พร้อมทั้งเปิดโอกาสให้ใช้ประโยชน์จากเทคนิคการตรวจวัดด้วยแสงฟลูออเรสเซนซ์

การรวมตัวที่เสถียรของรีพอร์ตเตอร์ eGFP ช่วยให้สามารถสังเกตเซลล์ A375-GFP ได้แบบเรียลไทม์ ทั้งในระบบ in vitro และ in vivo การถ่ายภาพด้วยแสงฟลูออเรสเซนซ์ช่วยในการติดตามการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเคลื่อนที่ การรุกราน และการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา รวมถึงการติดตามการเติบโตของก้อนมะเร็งและการแพร่กระจายของมะเร็งในแบบจำลอง xenograft ตัวแปร GFP ที่ได้รับการปรับปรุงนี้ให้ความสว่างและความเสถียรที่ดีขึ้นเมื่อเทียบกับโครงสร้าง GFP รุ่นก่อน ทำให้สามารถตรวจจับได้อย่างละเอียดแม้ในจำนวนเซลล์ที่น้อย ซึ่งทำให้ A375-GFP มีประโยชน์เป็นพิเศษในการทดลองการเพาะเลี้ยงร่วม (co-culture) แพลตฟอร์มการถ่ายภาพเนื้อหาสูง (high-content imaging) และการศึกษาที่ต้องการความละเอียดเชิงพื้นที่ที่แม่นยำในการวิเคราะห์พฤติกรรมของเซลล์มะเร็ง

A375-GFP ยังคงรักษาลักษณะทางฟีโนไทป์ที่ก้าวร้าวและมีการเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็วของสายพันธุ์เมลาโนมาต้นแบบไว้ รวมถึงการตอบสนองต่อสารยับยั้งทาง MAPK และความสามารถในการรุกรานและแพร่กระจายในแบบจำลองการทดลอง การเพิ่ม GFP เข้าไปช่วยขยายประโยชน์การใช้งานสำหรับการคัดกรองยา การถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต และการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างเนื้องอกกับสภาพแวดล้อมจุลภาค เช่นเดียวกับสายเซลล์อื่น ๆ ที่ติดตัวรายงาน (reporter-labeled) แนะนำให้ตรวจสอบความเสถียรและความสม่ำเสมอของแสงฟลูออเรสเซนซ์ตลอดการเพาะเลี้ยงหลายครั้ง สำหรับการประยุกต์ใช้ในทดลองเฉพาะทาง

การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ได้รับการดัดแปลงอย่างเสถียรผ่านกระบวนการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงโปรตีนเรพอร์เตอร์ ZsGreen1 ที่เรืองแสงสีเขียว; รักษาไว้ในรูปแบบประชากรโพลีโคลนอลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL). ระดับการควบคุมความปลอดภัย S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.