A375-GFP

A375-GFP er en genetisk modifisert variant av den humane ondartede melanomcellelinjen A375, som stabilt uttrykker forsterket grønt fluorescerende protein (eGFP). Den opprinnelige A375-cellelinjen stammer fra en hudmelanomtumor hos en voksen pasient og brukes mye som modell for kutan melanom, særlig i studier som omhandler onkogen BRAF-signalering, da den bærer BRAF V600E-mutasjonen. Denne mutasjonen fører til konstant aktivering av MAPK/ERK-signalveien, noe som fremmer celleproliferasjon og overlevelse, og gjør A375-celler svært relevante for undersøkelse av målrettede terapier, slik som BRAF- og MEK-hemmere. Den GFP-uttrykkende varianten beholder disse molekylære og fenotypiske egenskapene, samtidig som den muliggjør fluorescensbaserte anvendelser.

Den stabile innbyggingen av eGFP-reporteren muliggjør visualisering i sanntid av A375-GFP-celler både i in vitro- og in vivo-systemer. Fluorescensavbildning letter overvåking av celleproliferasjon, migrasjon, invasjon og morfologiske endringer, samt sporing av tumorvekst og metastatisk spredning i xenotransplantatmodeller. Den forbedrede GFP-varianten gir økt lysstyrke og stabilitet sammenlignet med tidligere GFP-konstruksjoner, noe som muliggjør følsom deteksjon selv ved lave celletall. Dette gjør A375-GFP særlig nyttig i samdyrkningsforsøk, plattformer for high-content-avbildning og studier som krever presis romlig oppløsning av tumorcellers atferd.

A375-GFP opprettholder den aggressive og proliferative fenotypen til den opprinnelige melanomlinjen, inkludert respons på MAPK-signalveihhemmere og evnen til invasjon og metastasering i eksperimentelle modeller. Tilsetningen av GFP utvider bruksområdet for legemiddelscreening, avbildning av levende celler og studier av interaksjonen mellom svulst og mikromiljø. I likhet med andre reportermerkede cellelinjer anbefales det å validere fluorescensstabiliteten og konsistensen gjennom flere passasjer for spesifikke eksperimentelle anvendelser.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke det grønne fluorescerende proteinreporteren ZsGreen1; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-inneslutning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring