A375-GFP

A375-GFP ir ģenētiski modificēts cilvēka ļaundabīgās melanomas šūnu līnijas A375 variants, kas stabili ekspresē pastiprinātu zaļo fluorescējošo proteīnu (eGFP). Sākotnējā A375 šūnu līnija ir iegūta no pieauguša pacienta ādas melanomas audzēja un tiek plaši izmantota kā ādas melanomas modelis, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar onkogēno BRAF signālceļu, jo tajā ir BRAF V600E mutācija. Šī mutācija izraisa MAPK/ERK signālceļa konstitutīvu aktivāciju, veicinot šūnu proliferāciju un izdzīvošanu, tādējādi padarot A375 šūnas ļoti piemērotas mērķtiecīgu terapiju, piemēram, BRAF un MEK inhibitoru, izpētei. GFP ekspresējošais atvasinājums saglabā šīs molekulārās un fenotipiskās īpašības, vienlaikus ļaujot veikt uz fluorescenci balstītus pētījumus.

Stabila eGFP reportera iekļaušana ļauj reāllaikā vizualizēt A375-GFP šūnas gan in vitro, gan in vivo sistēmās. Fluorescences attēlveidošana atvieglo šūnu proliferācijas, migrācijas, invāzijas un morfoloģisko izmaiņu uzraudzību, kā arī audzēja augšanas un metastāžu izplatības izsekošanu ksenotransplantātu modeļos. Uzlabotais GFP variants nodrošina labāku spilgtumu un stabilitāti salīdzinājumā ar agrākajiem GFP konstruktiem, ļaujot veikt jutīgu noteikšanu pat pie maza šūnu skaita. Tas padara A375-GFP īpaši noderīgu kopkultūras eksperimentos, augstas izšķirtspējas attēlveidošanas platformās un pētījumos, kuros nepieciešama precīza audzēja šūnu uzvedības telpiskā izšķirtspēja.

A375-GFP saglabā vecāku melanomas līnijas agresīvo un proliferatīvo fenotipu, tostarp reaģēšanu uz MAPK ceļa inhibitoriem un spēju invazēt un veidot metastāzes eksperimentālajos modeļos. GFP pievienošana paplašina tās pielietojamību zāļu skrīningā, dzīvo šūnu attēlveidošanā un audzēja un mikroapvidus mijiedarbības pētījumos. Tāpat kā citām ar reporteru marķētām šūnu līnijām, konkrētiem eksperimentāliem pielietojumiem ieteicams pārbaudīt fluorescences stabilitāti un konsekvenci visās pasāžās.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificēta ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļās fluorescences proteīna reporteru; tiek uzturēta kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu