A375-GFP

A375-GFP هو نسخة معدلة وراثياً من سلالة الخلايا البشرية A375 الخاصة بسرطان الجلد الخبيث، والتي تعبر بشكل مستقر عن البروتين الأخضر الفلوري المعزز (eGFP). وقد استُمد خط الخلايا الأصلي A375 من ورم سرطاني جلدي في مريض بالغ، ويُستخدم على نطاق واسع كنموذج لسرطان الجلد الميلانيني، لا سيما في الدراسات التي تتناول إشارات BRAF المسببة للسرطان، حيث إنه يحمل طفرة BRAF V600E. يؤدي هذا الطفرة إلى التنشيط المستمر لمسار MAPK/ERK، مما يحفز التكاثر والبقاء، ويجعل خلايا A375 ذات صلة وثيقة بدراسة العلاجات الموجهة مثل مثبطات BRAF وMEK. ويحتفظ السلالة المُنتجة لـ GFP بهذه الخصائص الجزيئية والظاهرية، مع تمكين الاستخدامات القائمة على الفلورة.

يتيح الدمج المستقر لمؤشر eGFP التصوير في الوقت الحقيقي لخلايا A375-GFP في كل من الأنظمة المختبرية والحيوية. يسهل التصوير الفلوري مراقبة تكاثر الخلايا وهجرتها وغزوها والتغيرات المورفولوجية، بالإضافة إلى تتبع نمو الورم وانتشاره النقلي في نماذج الزرع بين الأنواع. يوفر متغير GFP المحسّن سطوعًا واستقرارًا أفضل مقارنةً بتركيبات GFP السابقة، مما يتيح الكشف الدقيق حتى عند وجود أعداد قليلة من الخلايا. وهذا يجعل A375-GFP مفيدًا بشكل خاص في تجارب الزراعة المشتركة، ومنصات التصوير عالية المحتوى، والدراسات التي تتطلب دقة مكانية دقيقة لسلوك الخلايا السرطانية.

يحتفظ A375-GFP بالنمط الظاهري العدواني والمتكاثر لسلالة سرطان الجلد الأصلية، بما في ذلك الاستجابة لمثبطات مسار MAPK والقدرة على الغزو والانتشار في النماذج التجريبية. توسع إضافة GFP من فائدته في فحص الأدوية، وتصوير الخلايا الحية، ودراسات التفاعل بين الورم والبيئة المحيطة. وكما هو الحال مع سلالات الخلايا الأخرى المُعلَّمة بمُبلغ، يُوصى بالتحقق من استقرار الفلورة واتساقها عبر المراحل للتطبيقات التجريبية المحددة.

التعديل الجيني: تم تعديله بشكل مستقر عن طريق نقل فيروسي لينتي غير قادر على التكاثر للتعبير عن بروتين الفلورة الخضراء ZsGreen1 المُبلغ؛ ويتم الحفاظ عليه كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان