A375-GFP

A375-GFP je gensko spremenjena različica človeške celične linije malignega melanoma A375, ki stabilno izraža okrepljen zeleni fluorescenčni protein (eGFP). Izvorna celična linija A375 izhaja iz kožnega melanomskega tumorja pri odraslem pacientu in se pogosto uporablja kot model za kožni melanom, zlasti za študije, ki vključujejo onkogeno signalizacijo BRAF, saj vsebuje mutacijo BRAF V600E. Ta mutacija vodi do konstitutivne aktivacije poti MAPK/ERK, kar spodbuja proliferacijo in preživetje ter zaradi česar so celice A375 zelo primerne za raziskovanje ciljnih terapij, kot so zaviralci BRAF in MEK. Derivata, ki izraža GFP, ohranja te molekularne in fenotipne značilnosti, hkrati pa omogoča uporabo na podlagi fluorescenčnega slikanja.

Stabilna vgradnja eGFP-reporterja omogoča vizualizacijo celic A375-GFP v realnem času tako v sistemih in vitro kot in vivo. Fluorescenčno slikanje olajšuje spremljanje celične proliferacije, migracije, invazije in morfoloških sprememb ter sledenje rasti tumorja in metastaziranja v modelih ksenotransplantatov. Izboljšana različica GFP zagotavlja večjo svetlost in stabilnost v primerjavi s prejšnjimi GFP-konstrukti, kar omogoča občutljivo zaznavanje tudi pri majhnem številu celic. Zaradi tega je A375-GFP še posebej uporaben v poskusih s kokulturo, na platformah za visoko-vsebinsko slikanje ter v študijah, ki zahtevajo natančno prostorsko ločljivost vedenja tumorskih celic.

A375-GFP ohranja agresiven in proliferativni fenotip izvorne linije melanoma, vključno z odzivnostjo na zaviralce poti MAPK ter zmožnostjo invazije in metastaziranja v eksperimentalnih modelih. Dodatek GFP razširja njegovo uporabnost za presejanje zdravil, slikanje živih celic in študije interakcij med tumorjem in mikrookoljem. Tako kot pri drugih celičnih linijah, označenih z reporterjem, se za določene eksperimentalne namene priporoča preverjanje stabilnosti in doslednosti fluorescenčnega signala med posameznimi pasážami.

Genetska modifikacija: Stabilno modificirana z replikacijsko nesposobno lentiviralno transdukcijo za izražanje zelenega fluorescenčnega beljakovinskega reporterja ZsGreen1; vzdrževana kot poliklonalna populacija pod selekcijo s puromicinom (1–5 µg/mL). Varnostna stopnja S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo