A375-GFP

A375-GFP är en genetiskt modifierad variant av den humana cellinjen A375 för malignt melanom, som stabilt uttrycker förstärkt grönt fluorescerande protein (eGFP). Den ursprungliga A375-cellinjen härstammar från en hudmelanomtumör hos en vuxen patient och används i stor utsträckning som modell för hudmelanom, särskilt för studier som rör onkogen BRAF-signalering, eftersom den bär på BRAF V600E-mutationen. Denna mutation leder till en konstant aktivering av MAPK/ERK-signalvägen, vilket driver celltillväxt och överlevnad och gör A375-cellerna särskilt relevanta för forskning kring riktade terapier, såsom BRAF- och MEK-hämmare. Den GFP-uttryckande varianten behåller dessa molekylära och fenotypiska egenskaper samtidigt som den möjliggör fluorescensbaserade tillämpningar.

Den stabila inkorporeringen av eGFP-reportern möjliggör visualisering i realtid av A375-GFP-celler i både in vitro- och in vivo-system. Fluorescensavbildning underlättar övervakning av cellproliferation, migration, invasion och morfologiska förändringar, samt spårning av tumörtillväxt och metastatisk spridning i xenotransplantatmodeller. Den förbättrade GFP-varianten ger ökad ljusstyrka och stabilitet jämfört med tidigare GFP-konstruktioner, vilket möjliggör känslig detektion även vid låga cellantal. Detta gör A375-GFP särskilt användbar i samodlingsförsök, plattformar för höginnehållsavbildning och studier som kräver exakt rumslig upplösning av tumörcellernas beteende.

A375-GFP behåller den aggressiva och proliferativa fenotypen hos den ursprungliga melanomlinjen, inklusive responsen på hämmare av MAPK-signalvägen och förmågan till invasion och metastasering i experimentella modeller. Tillsatsen av GFP utökar dess användbarhet för läkemedelsscreening, avbildning av levande celler och studier av interaktionen mellan tumör och mikromiljö. Precis som med andra reportermärkta cellinjer rekommenderas validering av fluorescensstabilitet och konsistens över olika passager för specifika experimentella tillämpningar.

Genetisk modifiering: Stabilt modifierad genom replikationsinkompetent lentiviral transduktion för att uttrycka det gröna fluorescerande proteinreportern ZsGreen1; hålls som en polyklonal population under puromycinselektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-säkerhetsklass.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring