A375-GFP

A375-GFP on ihmisen pahanlaatuisen melanooman solulinjan A375 geneettisesti muunnettu variantti, joka ilmentää vakaasti tehostettua vihreää fluoresoivaa proteiinia (eGFP). Alkuperäinen A375-solulinja on peräisin aikuispotilaan ihomelanoomakasvaimesta, ja sitä käytetään laajalti ihomelanooman mallina, erityisesti tutkimuksissa, jotka liittyvät onkogeeniseen BRAF-signalointiin, sillä se kantaa BRAF V600E -mutaatiota. Tämä mutaatio johtaa MAPK/ERK-signalointireitin jatkuvaan aktivoitumiseen, mikä edistää solujen lisääntymistä ja selviytymistä ja tekee A375-soluista erittäin merkityksellisiä kohdennettujen hoitojen, kuten BRAF- ja MEK-estäjien, tutkimuksessa. GFP:tä ilmentävä johdannainen säilyttää nämä molekyyliset ja fenotyyppiset ominaisuudet samalla kun se mahdollistaa fluoresenssipohjaiset sovellukset.

eGFP-raportoijan vakaa sisällyttäminen mahdollistaa A375-GFP-solujen reaaliaikaisen visualisoinnin sekä in vitro- että in vivo -järjestelmissä. Fluoresenssikuvantaminen helpottaa solujen proliferaation, migraation, invaasion ja morfologisten muutosten seurantaa sekä kasvaimen kasvun ja metastaattisen leviämisen seurantaa ksenotransplantaattimalleissa. Tehostettu GFP-variantti tarjoaa paremman kirkkauden ja vakauden verrattuna aikaisempiin GFP-konstruktioihin, mikä mahdollistaa herkän havaitsemisen jopa pienillä solumäärillä. Tämä tekee A375-GFP:stä erityisen hyödyllisen yhteisviljelykokeissa, korkean sisällön kuvantamisalustoilla sekä tutkimuksissa, jotka vaativat tarkkaa spatiaalista resoluutiota kasvainsolujen käyttäytymisen tarkastelussa.

A375-GFP säilyttää emomelanoomalinjan aggressiivisen ja proliferaatiivisen fenotyypin, mukaan lukien herkkyyden MAPK-reitin estäjille sekä invaasio- ja metastaasikyvyn kokeellisissa malleissa. GFP:n lisääminen laajentaa sen käyttökelpoisuutta lääkeaineiden seulonnassa, elävien solujen kuvantamisessa sekä kasvaimen ja mikroympäristön välisten vuorovaikutusten tutkimuksissa. Kuten muidenkin raportointigeenillä merkittyjen solulinjojen kohdalla, fluoresenssin vakauden ja yhdenmukaisuuden validointi soluviljelmien siirtojen välillä on suositeltavaa tiettyjä kokeellisia sovelluksia varten.

Geneettinen muuntelu: Stabiilisti muunnettu replikaatiokyvytön lentiviruksen välityksellä ilmentämään ZsGreen1-vihreää fluoresoivaa proteiinireportteria; ylläpidetään polyklonaalisena populaationa puromysiinivalinnassa (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-turvaluokitus.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa