A375-GFP

A375-GFP ist eine gentechnisch veränderte Variante der menschlichen malignen Melanom-Zelllinie A375, die stabil das Enhanced Green Fluorescent Protein (eGFP) exprimiert. Die ursprüngliche A375-Zelllinie stammt von einem Hautmelanom eines erwachsenen Patienten und wird häufig als Modell für das kutane Melanom verwendet, insbesondere für Untersuchungen zur onkogenen BRAF-Signalübertragung, da sie die BRAF-V600E-Mutation aufweist. Diese Mutation führt zu einer konstitutiven Aktivierung des MAPK/ERK-Signalwegs, was die Proliferation und das Überleben fördert und A375-Zellen für die Untersuchung zielgerichteter Therapien wie BRAF- und MEK-Inhibitoren äußerst relevant macht. Das GFP-exprimierende Derivat behält diese molekularen und phänotypischen Eigenschaften bei und ermöglicht gleichzeitig fluoreszenzbasierte Anwendungen.

Die stabile Einbindung des eGFP-Reporters ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung von A375-GFP-Zellen sowohl in In-vitro- als auch in In-vivo-Systemen. Die Fluoreszenzbildgebung erleichtert die Überwachung von Zellproliferation, Migration, Invasion und morphologischen Veränderungen sowie die Verfolgung des Tumorwachstums und der metastatischen Ausbreitung in Xenotransplantatmodellen. Die verbesserte GFP-Variante bietet im Vergleich zu früheren GFP-Konstrukten eine höhere Leuchtkraft und Stabilität und ermöglicht so einen sensitiven Nachweis selbst bei geringen Zellzahlen. Dies macht A375-GFP besonders nützlich für Kokultur-Experimente, High-Content-Imaging-Plattformen und Studien, die eine präzise räumliche Auflösung des Tumorzellverhaltens erfordern.

A375-GFP behält den aggressiven und proliferativen Phänotyp der ursprünglichen Melanomlinie bei, einschließlich der Reaktionsfähigkeit auf Inhibitoren des MAPK-Signalwegs und der Fähigkeit zur Invasion und Metastasierung in experimentellen Modellen. Die Einbringung von GFP erweitert den Einsatzbereich für das Wirkstoffscreening, die Live-Cell-Bildgebung und Untersuchungen zur Interaktion zwischen Tumor und Mikroumgebung. Wie bei anderen mit Reportern markierten Zelllinien wird für spezifische experimentelle Anwendungen eine Validierung der Fluoreszenzstabilität und -konsistenz über mehrere Passagen hinweg empfohlen.

Genetische Modifikation: Stabil modifiziert durch replikationsinkompetente lentivirale Transduktion zur Expression des grün fluoreszierenden Proteins ZsGreen1; als polyklonale Population unter Puromycin-Selektion (1–5 µg/mL) erhalten. Sicherheitsstufe S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung