A375-GFP

A375-GFP is een genetisch gemodificeerde variant van de menselijke kwaadaardige melanoomcellijn A375, die op stabiele wijze het versterkte groene fluorescerende eiwit (eGFP) tot expressie brengt. De oorspronkelijke A375-cellijn is afkomstig van een huidmelanoomtumor bij een volwassen patiënt en wordt op grote schaal gebruikt als model voor huidmelanoom, met name voor onderzoek naar oncogene BRAF-signalering, aangezien deze de BRAF V600E-mutatie bevat. Deze mutatie leidt tot een constitutieve activering van de MAPK/ERK-route, wat de proliferatie en overleving stimuleert en A375-cellen zeer geschikt maakt voor onderzoek naar gerichte therapieën, zoals BRAF- en MEK-remmers. Het GFP-expresserende derivaat behoudt deze moleculaire en fenotypische kenmerken en maakt tegelijkertijd toepassingen op basis van fluorescentie mogelijk.

Door de stabiele integratie van de eGFP-reporter kunnen A375-GFP-cellen zowel in in-vitro- als in-vivo-systemen in realtime worden gevisualiseerd. Fluorescentiebeeldvorming vergemakkelijkt het monitoren van celproliferatie, migratie, invasie en morfologische veranderingen, evenals het volgen van tumorgroei en metastatische verspreiding in xenotransplantaatmodellen. De verbeterde GFP-variant biedt een hogere helderheid en stabiliteit in vergelijking met eerdere GFP-constructen, waardoor gevoelige detectie mogelijk is, zelfs bij lage celaantallen. Dit maakt A375-GFP bijzonder bruikbaar in co-cultuurexperimenten, high-content beeldvormingsplatforms en onderzoeken die een nauwkeurige ruimtelijke resolutie van het gedrag van tumorcellen vereisen.

A375-GFP behoudt het agressieve en proliferatieve fenotype van de oorspronkelijke melanoomlijn, inclusief de respons op remmers van de MAPK-route en het vermogen tot invasie en metastase in experimentele modellen. De toevoeging van GFP vergroot de bruikbaarheid ervan voor het screenen van geneesmiddelen, beeldvorming van levende cellen en onderzoek naar de interactie tussen tumor en micro-omgeving. Net als bij andere met een reporter gemerkte cellijnen wordt voor specifieke experimentele toepassingen aanbevolen de stabiliteit en consistentie van de fluorescentie over verschillende passages te valideren.

Genetische modificatie: Stabiel gemodificeerd door replicatie-incompetente lentivirale transductie om de ZsGreen1-groene fluorescerende eiwitreporter tot expressie te brengen; in stand gehouden als een polyklonale populatie onder puromycineselectie (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-beheersingsniveau.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring