A375-GFP

A375-GFP on inimese pahaloomulise melanoomi rakuliini A375 geneetiliselt muundatud variant, mis ekspresseerib stabiilselt tugevdatud rohelist fluorestsentsvalku (eGFP). Algrakuliin A375 on saadud täiskasvanud patsiendi nahamelanoomi kasvajast ja seda kasutatakse laialdaselt nahamelanoomi mudelina, eriti uuringutes, mis käsitlevad onkogeenset BRAF-signaalimist, kuna see sisaldab BRAF V600E mutatsiooni. See mutatsioon põhjustab MAPK/ERK signaalitee konstitutiivset aktiveerumist, soodustades proliferatsiooni ja ellujäämist ning muutes A375-rakud väga sobivaks sihtterapiate, nagu BRAF- ja MEK-inhibiitorite uurimiseks. GFP-d ekspresseeriv derivaat säilitab need molekulaarsed ja fenotüübilised omadused, võimaldades samal ajal fluorestsentsipõhiseid rakendusi.

eGFP-reporteri stabiilne sisseviimine võimaldab A375-GFP-rakkude reaalajas visualiseerimist nii in vitro kui ka in vivo süsteemides. Fluorestsentspildistamine hõlbustab rakkude proliferatsiooni, migratsiooni, invasiivsuse ja morfoloogiliste muutuste jälgimist, samuti kasvaja kasvu ja metastaaside leviku jälgimist ksenotransplantaadi mudelites. Täiustatud GFP-variant pakub varasemate GFP-konstruktsioonidega võrreldes paremat heledust ja stabiilsust, võimaldades tundlikku tuvastamist isegi väikese rakukoguse korral. See muudab A375-GFP eriti kasulikuks ko-kultuuri katsetes, suure infosisaldusega pildistamisplatvormidel ning uuringutes, mis nõuavad kasvajarakkude käitumise täpset ruumilist eraldusvõimet.

A375-GFP säilitab emaliini agressiivse ja proliferatiivse fenotüübi, sealhulgas reageerimisvõime MAPK-signaalitee inhibiitoritele ning invasiivsuse ja metastaaside tekkimise võime eksperimentaalsetes mudelites. GFP lisamine laiendab selle kasutusvõimalusi ravimite sõelumisel, elusrakkude pildistamisel ning kasvaja ja mikrokeskkonda vahelise interaktsiooni uuringutes. Nagu teistegi reportervalkudega märgistatud rakuliinide puhul, soovitatakse konkreetsete eksperimentaalsete rakenduste jaoks kontrollida fluorestsentsi stabiilsust ja järjepidevust erinevate passaažide vahel.

Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; säilitatakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest