A375-GFP

A375-GFP je geneticky modifikovaná varianta lidské buněčné linie A375 pocházející z maligního melanomu, která stabilně exprimuje zesílený zelený fluorescenční protein (eGFP). Původní buněčná linie A375 pochází z kožního melanomu dospělého pacienta a je široce využívána jako model kožního melanomu, zejména pro studie týkající se onkogenní BRAF signalizace, jelikož nese mutaci BRAF V600E. Tato mutace vede ke konstitutivní aktivaci signální dráhy MAPK/ERK, která podporuje proliferaci a přežití buněk, díky čemuž jsou buňky A375 vysoce relevantní pro výzkum cílených terapií, jako jsou inhibitory BRAF a MEK. Derivát exprimující GFP si zachovává tyto molekulární a fenotypové vlastnosti a zároveň umožňuje aplikace založené na fluorescenci.

Stabilní začlenění reportéru eGFP umožňuje vizualizaci buněk A375-GFP v reálném čase jak v systémech in vitro, tak in vivo. Fluorescenční zobrazování usnadňuje sledování buněčné proliferace, migrace, invaze a morfologických změn, stejně jako sledování růstu nádoru a šíření metastáz v modelech xenotransplantátů. Vylepšená varianta GFP poskytuje vyšší jas a stabilitu ve srovnání s dřívějšími GFP konstrukty, což umožňuje citlivou detekci i při malém počtu buněk. Díky tomu je A375-GFP obzvláště užitečný v experimentech s kokulturami, na platformách pro high-content imaging a ve studiích vyžadujících přesné prostorové rozlišení chování nádorových buněk.

A375-GFP si zachovává agresivní a proliferativní fenotyp mateřské melanomové linie, včetně citlivosti na inhibitory signální dráhy MAPK a schopnosti invaze a metastázování v experimentálních modelech. Přidání GFP rozšiřuje její využitelnost pro screening léčiv, zobrazování živých buněk a studie interakcí mezi nádorem a mikroprostředím. Stejně jako u jiných buněčných linií značených reportérem se pro konkrétní experimentální aplikace doporučuje ověření stability a konzistence fluorescence v průběhu pasáží.

Genetická modifikace: Stabilně modifikováno lentivirovou transdukcí neschopnou replikace k expresi reportéru zeleného fluorescenčního proteinu ZsGreen1; udržováno jako polyklonální populace pod selekcí puromycinem (1–5 µg/ml). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení