Skip to content
AT-1
Tissue
ต่อมลูกหมาก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Documents

AT-1

Cell line · Product number 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ AT-1 เป็นสายย่อยของสายเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากหนู R3327 ซึ่งเป็นสายเซลล์ต้นแบบ สายเซลล์นี้ได้มาจากแบบจำลอง Dunning ซึ่งเป็นแบบจำลองที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางในการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งต่อมลูกหมากซับโคลน AT-1 มีลักษณะเด่นคืออัตราการเจริญเติบโตที่ค่อนข้างช้าและศักยภาพในการแพร่กระจายต่ำเมื่อเทียบกับซับโคลนอื่นๆ ที่มาจากเนื้องอกเดียวกัน เช่น สายเซลล์ MatLyLu (มีศักยภาพในการแพร่กระจายสูง) และ AT-2 (มีศักยภาพในการแพร่กระจายปานกลาง) สิ่งนี้ทำให้สายเซลล์ AT-1 มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่มุ่งเน้นชีววิทยาของเนื้องอกที่ไม่แพร่กระจายหรือมีการรุกล้ำน้อย

ในการวิจัย สายเซลล์ AT-1 ได้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางเพื่อศึกษาการดำเนินโรคของมะเร็งต่อมลูกหมากและประเมินประสิทธิภาพของสารบำบัด เซลล์เหล่านี้โดยทั่วไปมีลักษณะเป็นทรงลูกบาศก์และยึดติดกับพื้นผิว พบว่าเซลล์ตอบสนองต่อการปรับเปลี่ยนฮอร์โมน ซึ่งจำลองการตอบสนองของฮอร์โมนที่พบในมะเร็งต่อมลูกหมากทางคลินิกการศึกษาที่ใช้เซลล์ไลน์ AT-1 ได้ช่วยเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์มะเร็งกับสภาพแวดล้อมรอบเซลล์ (microenvironment) การสร้างหลอดเลือดใหม่ (angiogenesis) และเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็ง (cancer progression) อย่างมีนัยสำคัญ เซลล์ไลน์ AT-1 ได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการพัฒนา стратегииการรักษาที่มุ่งเน้นไปที่การเจริญเติบโตของก้อนมะเร็งต้นกำเนิด (primary tumor growth) และการลุกลามในท้องถิ่น (local invasion) มากกว่าการแพร่กระจายของมะเร็ง (metastasis)

Tissue
ต่อมลูกหมาก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูทดลองและหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
AT-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 500121)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ที่ความหนาแน่น 4 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า